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胚肺成纖維細(xì)胞:IMR-90

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-10 15:22:31瀏覽次數(shù):257次

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elisa檢測試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
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PCR檢測試劑盒
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試劑盒
進(jìn)口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01X0530
胚肺成纖維細(xì)胞:IMR-90 公司正在出售的產(chǎn)品:500次 一管式植物DNAout One-Tube Plant DNAOUT 常溫2 ug pET-3d pET-3d 低溫運(yùn)輸,-20℃保存10mL RNase-free 水 RNase-free Water 常溫1瓶 95-D細(xì)胞株 95-D 低溫運(yùn)輸和保存50T 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒 Classical Swine Fever Viru

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

胚肺成纖維細(xì)胞:IMR-90 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號

GOY-01X0530

商品介紹:

名稱 胚肺成纖維細(xì)胞:IMR-90 

別稱IMR 90; IMR90; Institute for Medical Research-90; I90

種屬人類

年齡(性別)女性,16周齡

組織來源肺

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

背景描述IMR-90細(xì)胞是由W·W·Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材建立的人二倍體成纖維細(xì)胞株。分裂潛能、病毒感受性和其它性質(zhì)都得到了充分研究,因而這株細(xì)胞可以作為WI-38或其它標(biāo)準(zhǔn)人肺細(xì)胞株的替代株。有報道稱,IMR-90細(xì)胞在表現(xiàn)出衰老前可倍增58次。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

注意事項(xiàng)該細(xì)胞為有限傳代細(xì)胞系,請注意代次控制。

使用方法:

收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) HA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

KLK-4 / Kallikrein-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

IL-17F /

胚肺成纖維細(xì)胞:IMR-90 RanBP2  RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

FAP1/PTPN13  Fas相關(guān)磷酸1/蛋白磷酸非受體型13抗體 規(guī)格: 0.2ml

1瓶 Calu-3細(xì)胞株 Calu-3 低溫運(yùn)輸和保存

CGR19  細(xì)胞生調(diào)控蛋白19抗體(環(huán)指蛋白197) 規(guī)格: 0.2ml

2 ug pSEP3 pSEP3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

2500mL Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0  Tricine Buffered Saline,5X,pH8.0  常溫保存

100g 預(yù)混型丙烯酰胺-甲叉雙丙烯干粉(19:1) Premixed  Acr-Bis Powder 避光干燥保存

1套 糖蛋白PAGE染液  

0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)顆粒  300ml*10

1g  G 鈉鹽 Penicillin G Sodium Salt 室溫保存

2 ug pINIIIompA pINIIIompA 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

MYBPC1  肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體 規(guī)格: 0.2mlSAHH  S苷L-同型半水解 規(guī)格: 0.2ml

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