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Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片

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所  在  地上海市

更新時間:2019-03-11 23:04:10瀏覽次數:264次

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產地 進口 加工定制
適用領域 其他
Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片取適量已轉化的感受態細胞涂布含相應抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培養12-16小時。涂布用量可根據具體實驗來調整,如轉化的DNA總量較多,可取100ul左右的轉化產物涂板;反之,如轉化的DNA總量較少,可取200-300ul的轉化產物涂板。

中文名稱:Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片
規格:100ul*10
用途:生化試劑。(用于科研試驗研究)  
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋
使用說明:
1. Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動離心管。
4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養45~60min使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12~16h。

 


培養方法:
Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況,如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,留10ml培養液繼續培養。
培養實驗又要開始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養基混勻分瓶,T25瓶中加培養基至6-8ml,T75瓶加培養基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養。

96T0.78-50 ng/mL人胃蛋白酶原C(PG-C)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Gastricsin

96T0.78-50 ng/mL人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Prostaglandin-H2 D-isomerase

96T0.312-20 ng/mL人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Platelet factor 4

96T0.156-10 ng/mL人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Urokinase-type plasminogen activator

96T0.156-10 ng/mL人尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Urokinase plasminogen activator surface receptor

96T0.312-20 ng/mL人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Prostaglandin G/H synthase 1

96T31.2-2000 pg/mL人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Placenta growth factor

96T0.156-10 ng/mL人血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒人
Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片IL6 ProteinCynomolgus重組食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白

IL6 ProteinRat重組大鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白

IL6 ProteinMouse重組小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白

OSM ProteinMouse重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽)

LIF ProteinMouse重組小鼠 LIF 蛋白 (His 標簽)

LIF ProteinMouse重組小鼠 LIF 蛋白 (Fc 標簽)

OSM ProteinHuman重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標簽)

CNTF ProteinRat重組大鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白
操作方法:
一 、Y2HGold 感受態細胞100ul*10圖片熱激轉化法
1.    從-80℃冰箱取出感受態細胞冰浴融化后,吸取100μl感受態細胞轉移到-20℃過夜預冷的搖菌管中,加入質粒或連接產物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2.    42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過程不要搖動搖菌管。
3.    向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養基可提高2-3倍轉化效率),37℃、180rpm、45分鐘復蘇菌種。
4.    根據實驗要求(質粒,重組連接產物轉化),吸取不同體積已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的LB瓊脂培養基上,將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平       板,37℃過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
二、10分鐘快速轉化法                             
注:在使用卡那霉素,四環素等作為篩選抗性時,需要在SOC培養基中復蘇以提高轉化效率,當使用氨芐青霉素作為篩選抗性時,該步驟可以省略。感受態細胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養基,在37℃ 180rpm孵育1小時,然后轉移到37℃預熱的LB培養基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養基平板拿到37℃預熱。
2. DH 5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態細胞-DNA混合物轉移到已經37℃預熱的LB培養基上,涂均勻,表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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