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BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書

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elisa檢測試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
PCR試劑盒
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感覺態(tài)細(xì)胞
PCR檢測試劑盒
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細(xì)胞培養(yǎng)
產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 其他
BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞涂布含相應(yīng)抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培養(yǎng)12-16小時(shí)。涂布用量可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來調(diào)整,如轉(zhuǎn)化的DNA總量較多,可取100ul左右的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板;反之,如轉(zhuǎn)化的DNA總量較少,可取200-300ul的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂板。

使用說明:
1. BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動(dòng)離心管。
4.每個(gè)離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養(yǎng)45~60min使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12~16h。


培養(yǎng)方法:
BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況,如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)又要開始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細(xì)胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細(xì)胞*匯合時(shí),倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。

ELISA Kit for Human Heat-stable enterotoxin receptor

96T0.78-50 ng/mL人磷脂?;级嗑厶翘禺愋粤字窪 (PI-G PLD) ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D

96T0.625-40 ng/mL人細(xì)胞表面抗原A33(Cell surface A33 antigen)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Cell surface A33 antigen

96T0.312-20 ng/mL人N-氨基乙酸轉(zhuǎn)甲基酶(Glycine N-methyltransferase)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Glycine N-methyltransferase

96T0.78-50 ng/mL人轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白β鏈3(GNB3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3

96T0.156-10 ng/mL人骨形態(tài)生成蛋白3B(BMP-3B)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 3B

96T0.156-10 ng/mL人胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R) ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Glucagon-like peptide 1 receptor

96T1.56-100 ng/mL人谷胱甘肽過氧化物酶3(GPx-3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Glutathione peroxidase 3
BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書    1540  人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(HN-h)(1×106)

    1600  人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長)

    1610  人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC-os)(懸浮生長)

    1620  人膠質(zhì)細(xì)胞(少突細(xì)胞)(HO) (1×106 )

    1700  人雪旺細(xì)胞 ( HSC) ( 5×105 )

    1710  人神經(jīng)系統(tǒng)周邊細(xì)胞 (HPNC)( 5×105 )

    1800  人星形膠質(zhì)細(xì)胞 (HA) (1×106 )

    1810  人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 )

    1820  人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-sp)(1×106)

    1830  人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-h)(1×106)
中文名稱:BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書
規(guī)格:100ul*10
用途:生化試劑。(用于科研試驗(yàn)研究)  
儲(chǔ)存條件: -70℃保存,必須加干冰運(yùn)輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個(gè)月。
外觀:(性狀) 干冰運(yùn)輸,單加10kg干冰費(fèi)
單位: 袋
操作方法:
一 、BL21(AI) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10說明書熱激轉(zhuǎn)化法
1.    從-80℃冰箱取出感受態(tài)細(xì)胞冰浴融化后,吸取100μl感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到-20℃過夜預(yù)冷的搖菌管中,加入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2.    42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過程不要搖動(dòng)搖菌管。
3.    向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養(yǎng)基可提高2-3倍轉(zhuǎn)化效率),37℃、180rpm、45分鐘復(fù)蘇菌種。
4.    根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化),吸取不同體積已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂培養(yǎng)基上,將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平       板,37℃過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。
二、10分鐘快速轉(zhuǎn)化法                             
注:在使用卡那霉素,四環(huán)素等作為篩選抗性時(shí),需要在SOC培養(yǎng)基中復(fù)蘇以提高轉(zhuǎn)化效率,當(dāng)使用氨芐青霉素作為篩選抗性時(shí),該步驟可以省略。感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養(yǎng)基,在37℃ 180rpm孵育1小時(shí),然后轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養(yǎng)基平板拿到37℃預(yù)熱。
2. DH 5α感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到已經(jīng)37℃預(yù)熱的LB培養(yǎng)基上,涂均勻,表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí)。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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