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DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2019-03-09 15:26:14瀏覽次數:372次

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產地 進口 加工定制
適用領域 其他
DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書取適量已轉化的感受態細胞涂布含相應抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培養12-16小時。涂布用量可根據具體實驗來調整,如轉化的DNA總量較多,可取100ul左右的轉化產物涂板;反之,如轉化的DNA總量較少,可取200-300ul的轉化產物涂板。

中文名稱:Mach1-T1 感受態細胞100ul*20說明書
規格:100ul*20
用途:生化試劑。(用于科研試驗研究)  
儲存條件: -70℃保存,必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6個月。
外觀:(性狀) 干冰運輸,單加10kg干冰費
單位: 袋
使用說明:
1. Mach1-T1 感受態細胞100ul*20說明書取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。
2.待感受態細胞融化后,向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30min。
3. 42℃熱擊45sec,然后快速將離心管轉移到冰浴中,冰上靜置2-3min,該過程不要搖動離心管。
4.每個離心管中加入450 μl無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床, 150 rpm振蕩培養45~60min使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求,取適量已轉化的感受態細胞,加到含相應抗生素的SOC或LB固體瓊脂培養基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養,37℃培養12~16h。

 

以下是DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書的詳細介紹:點擊了解更多公司產品
操作方法:  
1.DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書取100μl冰上融化的DH5α感受態細胞,加入目的DNA(質粒或連接產物)并輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。  
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。  
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。  
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應  
抗生素的2YT或LB培養基上。  
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。  

產品名稱

DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書

規格

50ul*5

保存條件

-80℃ 六個月

注意事項:
1.DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書感受態細胞在冰上融化。  
2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。  
3.轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。

ELISA Kit for Human Bactericidal permeability-increasing protein

96T15.6-1000 pg/mL人β淀粉樣蛋白42(Beta-amyloid protein 42)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Beta-amyloid protein 42

96T78-5000 pg/mL人骨形成蛋白10(BMP-10)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 10

96T0.156-10 ng/mL人自噬蛋白1(BECN1)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Beclin-1

96T0.312-20 ng/mL人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Breast cancer type 1 susceptibility protein

96T15.6-1000 pg/mL人β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Beta-endorphin

96T31.2-2000 pg/mL人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 7

96T78-5000 pg/mL人B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Apoptosis regulator Bcl-2
DB3.1 電擊感受態細胞50ul*5說明書96T1.56-100 pmol/mL人肌聯蛋白(Titin)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Titin

96T15.6-1000 pg/mL人骨骼肌快肌肌鈣蛋白T Ⅲ型(TNNT3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Troponin T, fast skeletal muscle

96T0.312-20 ng/mL人尿液三葉因子3(TFF-3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Trefoil factor 3

96T0.625-40 ng/mL人β微管蛋白3(TUBB3)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Tubulin beta-3 chain

96T0.312-20 ng/mL人腫瘤壞死因子受體超族成員13B ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B

96T0.312-20 ng/mL人細胞質硫氧還蛋白還原酶1(TR)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Thioredoxin reductase 1, cytoplasmic

96T0.312-20 ng/mL人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Tyrosine 3-monooxygenase

96T1.56-100U/mL人轉錄因子4(TCF4/ITF2)ELISA試劑盒人

 

培養方法:
Mach1-T1 感受態細胞100ul*20說明書收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況,如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,留10ml培養液繼續培養。
培養實驗又要開始了,科研工作者又該忙碌了,大家可能都在尋找適合自己的細胞,不用急,我們幫您掌舵,讓您滿意!
傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養基混勻分瓶,T25瓶中加培養基至6-8ml,T75瓶加培養基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養。

ELISA Kit for Human Apolipoprotein C-II

96T78-5000 ng/mL人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Apolipoprotein B-100

96T0.312-20 ng/mL人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Beta-arrestin-2

96T1.56-100 ng/mL人金屬肽酶含血小板反應蛋白1(ADAMTS1) ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1

96T0.156-10 ng/mL人金屬肽酶含血小板反應蛋白7(ADAMTS7)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 7

96T0.156-10 ng/mL人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Arachidonate 12-lipoxygenase, 12S-type

96T1.56-100 ng/mL人載脂蛋白A4(apo-A4)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-IV

96T6.25-400 U/L人抗頂體蛋白抗體(ACR)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Acrosin
Mach1-T1 感受態細胞100ul*20說明書96T1.56-100 ng/mL人肺表面活性物質相關蛋白A(PSPA)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Pulmonary surfactant-associated protein A1

96T15.6-1000 ng/mL人抗凝血酶III(ATIII)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Antithrombin-III

96T1.56-100 ng/mL人克拉拉細胞磷脂結合蛋白(CC10)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Uteroglobin

96T1.56-100 ng/mL人素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Pigment epithelium-derived factor

96T3.12-200 ng/mL人骨粘連蛋白/骨連接素(ON)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human SPARC

96T0.156-10 ng/mL人內臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Serpin A12

96T0.156-10 ng/mL人Slit2 ELISA試劑盒人

ELISA Kit for Human Slit homolog 2 protein

96T1.56-100 ng/mL人Smad1 ELISA試劑盒人
操作方法:
一 、Mach1-T1 感受態細胞100ul*20說明書熱激轉化法
1.    從-80℃冰箱取出感受態細胞冰浴融化后,吸取100μl感受態細胞轉移到-20℃過夜預冷的搖菌管中,加入質粒或連接產物,輕輕混勻,冰浴30分鐘。
2.    42℃水浴熱激60秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,該過程不要搖動搖菌管。
3.    向搖菌管中加入900μl 37℃溫浴的SOC或LB(SOC培養基可提高2-3倍轉化效率),37℃、180rpm、45分鐘復蘇菌種。
4.    根據實驗要求(質粒,重組連接產物轉化),吸取不同體積已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的LB瓊脂培養基上,將細胞均勻涂開。將平板置于37℃至液體被吸收,倒置平       板,37℃過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。
二、10分鐘快速轉化法                             
注:在使用卡那霉素,四環素等作為篩選抗性時,需要在SOC培養基中復蘇以提高轉化效率,當使用氨芐青霉素作為篩選抗性時,該步驟可以省略。感受態細胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分鐘后加入4倍體積的37℃溫浴的SOC培養基,在37℃ 180rpm孵育1小時,然后轉移到37℃預熱的LB培養基上。
1. 提前15分鐘將用到的篩選培養基平板拿到37℃預熱。
2. DH 5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA并用手EP管底輕輕混勻,冰中靜置5分鐘。
3. 用200μl槍將感受態細胞-DNA混合物轉移到已經37℃預熱的

LB培養基上,涂均勻,表面無水漬。
4. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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