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測定意義

脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質氧化還原反應的酶，催化底物通過系統被氧化，釋放的能量供機體使用，是生物體取得能量的一種方式。

測定原理

在細胞呼吸過程中，氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈現紅色，于485nm測定其吸光值，即得脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品

天平、恒溫培養箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

骨架銜接蛋白BIN3抗體Human GEF-H1 ELISA Kit小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）ELISA試劑盒,

雙向染色體分裂蛋白1抗體Human GDPD5 ELISA Kit小鼠P物質（SP）ELISA試劑盒,

轉錄因子Brn3蛋白抗體Brn3αHuman GFPT1 ELISA Kit小鼠25羥基3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA試劑盒,

骨形態發生蛋白6抗體Human GDPD2 ELISA Kit大鼠嗜酸性粒陽離子蛋白（ECP）ELISA試劑盒,

腦鈉素抗體Human GEFT ELISA Kit大鼠水通道蛋白5（AQP-5）ELISA試劑盒,

骨形態發生蛋白3抗體Human GEM ELISA Kit大鼠6酮前列腺素（6-K-PG）ELISA試劑盒,

抑凋亡基因bag1抗體Human GEMIN5 ELISA Kit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA/TGAB）ELISA試劑盒,

蛙皮素受體3抗體Human GEMIN4 ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原端肽（PⅢNT）ELISA試劑盒,

脫氫酶(DHA)可見分光光度法檢測試劑盒胎兒血紅蛋白(HBF)免疫試劑盒進口、分裝

山羊抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)免疫試劑盒現貨供應

組織蛋白S(CTSS)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠白介素12(IL-12/P70)免疫試劑盒現貨供應

小鼠載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒現貨供應

豬鐵蛋白(FE)免疫試劑盒現貨供應

雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒*直銷

大鼠酰基轉移(LCAT)免疫試劑盒進口、分裝

大鼠新喋呤免疫試劑盒現貨供應

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。