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肉桂酸4羥化酶(C4H)微量法檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-28 09:37:57瀏覽次數(shù):188次

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elisa檢測試劑盒
ATCC細(xì)胞
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PCR檢測試劑盒
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生化檢測試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01S6955
肉桂酸4羥化酶(C4H)微量法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:冰凍切片免疫熒光顯微鏡直接檢測試劑盒(含熒光一抗) 10次
TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB基礎(chǔ)檢測試劑盒 50次
(無一抗和二抗)
TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB間接檢測試劑盒 20次
(含HRP二抗)
TEM電鏡冰凍切片免疫組織化學(xué)HRP聯(lián)DAB*間接檢測試劑盒 10次

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

肉桂酸4羥化酶(C4H)微量法檢測試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6955

商品介紹

測定意義

C4H又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶,多存在于高等植物、酵母、菌類中,該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽,是苯丙烷途徑中繼L-苯解氨酶之后的第二個關(guān)鍵酶。

測定原理:

C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH,在340nm下測定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

己二酸二甲酯 CP,98%正戊酰氯 98%IL-17  大鼠白介素-17

己二酸二甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2--5-硝基二苯酮 98%IL-18  大鼠白介素-18

1,10-癸二 98%4-烯氧基-2-羥基二苯甲酮 99%IL-19  大鼠白介素-19

甲基烯酸縮水甘油酯 98%二 99%IL-20  大鼠白介素-20

正己 99%二苯甲酮腙 98%IL-21  大鼠白介素-21

1,6-己二 98%2-甲基氨-5-氯二苯甲酮  99%IL-22  大鼠白介素-22

3-甲氧基苯乙酮 98%2-氯-5-硝基二苯甲酮  98%IL-23  大鼠白介素-23

1,8-辛二 98%二苯 99%rat adiponectin  大鼠脂聯(lián)素

肉桂酸4羥化酶(C4H)微量法檢測試劑盒猴子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

P53抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

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兔纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒*直銷

小鼠醇脫氫(SDH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

豬多巴胺(DA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

E3泛素蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒*直銷

猴子神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

Toll樣受體5(TLR5)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

甘露糖受體(MR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

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