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土壤脫氫酶(SDHA)可見分光光度法檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-27 15:50:53瀏覽次數(shù):224次

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細(xì)胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01S6844
土壤脫氫酶(SDHA)可見分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:脈沖凝膠電泳DNA樣品制備試劑盒 20次
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非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒 5次

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商品屬性:

產(chǎn)品名稱

土壤脫氫酶(SDHA)可見分光光度法檢測試劑盒

規(guī)格

50管/48樣

檢測方法

可見分光光度法

貨號

GOY-01S6844

商品介紹:

測定意義

土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機物的降解活性,可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。

測定原理:

氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后,被還原為三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈現(xiàn)紅色,在波長485nm處有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得土壤脫氫酶活性。

自備實驗儀器及用品:

篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機、漏斗,濾紙、可見分光光度計、玻璃比色可見分光光度計/酶標(biāo)儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、冰、蒸餾水、丙酮(不允許快遞,請用戶自備)。

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤管壁,可抗凝人血35ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔510分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

4-羥基苯甲酸異丁酯 99%N4-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷 98.0 %Anti-Nm23/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體IgG

4-羥基苯甲酸異酯 99%鹽酸環(huán)胞苷 98%Anti-Nm23-H1/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因抗體IgG

尼泊金甲酯 AR,99.0%2′-脫氧胞苷-5′-二鈉鹽 98%Anti-Nm23-H2/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤抑制基因抗體IgG

尼泊金甲酯 CP,98.0%2′-脫氧腺苷-5′-單 98%Anti-Nociceptin/FITC  熒光素標(biāo)記孤菲肽/痛敏肽抗體IgG

尼泊金甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%2'-脫氧 98%Anti-Nociceptin receptor/FITC  熒光素標(biāo)記孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體IgG

尼泊金甲酯 for insect cell culture,≥99.0%2',3'-二脫氧腺苷 98%Anti-NMP22/FITC  熒光素標(biāo)記核基質(zhì)蛋白22抗體IgG

尼泊金甲酯 ≥99%, FCC二叔丁基硅基雙(三氟磺酸)  97%Anti-Nogo-A/NEP /FITC  熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子-A抗體IgG

對羥基苯甲酸酯鈉 USP,Ph Eur2',3'-二脫氧胞苷 99.0%Anti-Nogo-B/A /FITC  熒光素標(biāo)記軸索過度生長抑制因子-B/A抗體IgG

土壤脫氫酶(SDHA)可見分光光度法檢測試劑盒犬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

E選擇素(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

綿羊白介素12(IL-12)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

兔骨保護素(OPG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

犬胰蛋白(trypsin)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

兔溶菌(LZM)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。

 


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