細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞：B16-F10 

別稱B16/F10; B16 F10; B16F10; B16 melanoma F10

種屬小鼠

年齡（性別）不詳

組織來源器官：皮膚；品系：C57BL/6J；疾病：黑色素瘤

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

背景描述B16-F10細(xì)胞是B16-F0細(xì)胞的亞系。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

注意事項(xiàng)B16系列細(xì)胞，使用DMEM培養(yǎng)時可能出現(xiàn)黑色素快速積累，細(xì)胞不增殖或死亡的情況，若您需要分泌黑色素相關(guān)實(shí)驗(yàn)可更換為DMEM培養(yǎng)。

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

小鼠 CD8a ELISA配對抗體

人 CD32b / FCGR2B ELISA配對抗體

小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL ELISA配對抗體

小鼠 DLL4 ELISA配對抗體

人 LILRB3 ELISA配對抗體

人 LCN1 / Lipocalin 1 ELISA配對抗體

人 IL17RD ELISA配對抗體

人 CD84 ELISA配對抗體

人 CD7 ELISA配對抗體

人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D ELISA配對抗體

小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞：B16-F10 50mL Nickel Chloride Solution（氯化鎳溶液）,0.5M  Nickel Chloride Solution,0.5M  常溫保存

30次 一站式CTAB-PAGE電泳套裝  

2 ug pLJM1-EGFP pLJM1-EGFP 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

10 mg DiI （細(xì)胞膜紅色熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL PIPES Buffered Saline，5X,pH6.8  PIPES Buffered Saline，5X,pH6.8  常溫保存

VDCC-L alpha/CCHL1A1  L-型電壓依賴型鈣通道α抗體 規(guī)格: 0.1ml

Anillin  胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlCCDC67  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體 規(guī)格: 0.2ml

WISP39/FKBPL  p21調(diào)控蛋白WISP39抗體 規(guī)格: 0.2ml

DRD3  多巴胺受體D3抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSPAN14  四分子交聯(lián)體14抗體（四旋蛋白） 規(guī)格: 0.2ml

NFKB p52/NFKB2  細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-GAB2(Ser623)  磷酸化接蛋白Gab2抗體 規(guī)格: 0.1mlPACRG  麻瘋和帕金森氏共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml