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T淋巴瘤細胞:HuT 102

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-06 13:21:22瀏覽次數(shù):166次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01X0120
T淋巴瘤細胞:HuT 102 公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pEcoli-6xHN-GFPuv pEcoli-6xHN-GFPuv 低溫運輸,-20℃保存SSDC培養(yǎng)基(ISO) SSDC Medium 250g2 ug pCMV-GFP pCMV-GFP 低溫運輸,-20℃保存50T 玉米GA21 PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存15次 動物線粒體純化試劑盒 Animal Mitoc

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產(chǎn)品名稱

T淋巴瘤細胞:HuT 102 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細胞系

貨號

GOY-01X0120

商品介紹:

名稱 T淋巴瘤細胞:HuT 102 

別稱HUT 102; Hut 102; HuT-102; Hut-102; HUT-102; HuT102; Hut102; HUT102; NCI-H102

年齡(性別)26

組織來源外周血

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài)淋巴母細胞樣

背景描述HuT 102細胞是一株T細胞淋巴瘤細胞系。HuT 102細胞具有成熟T細胞系的特征,細胞表面呈現(xiàn)IL-2活性、E花環(huán)陽性,表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT反應(yīng)陰性。HuT 102細胞還可釋放與T細胞淋巴瘤相關(guān)的單一C型逆轉(zhuǎn)病毒,即HTLVI病毒。

生物安全等級2

生長培養(yǎng)基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~38 hours

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

受體表達情況interleukin 2 (IL-2)

基因表達情況HTLV-I (human T cell leukemia virus)

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

食蟹猴 ACVRL1 基因全長ORF克隆

食蟹猴 ACVR2A 基因全長ORF克隆

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T淋巴瘤細胞:HuT 102 100次 即用型PCR試劑盒2.0  Instant PCR Kit 2.0 -20℃保存

2 ug pCMV-Flag-C pCMV-Flag-C 低溫運輸,-20℃保存

CD158a/KIR2DL1  NK細胞抑制性受體2DL1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

250mL 氨基黑染膜液 Amido Black 10B BlotStain 避光保存

BYP瓊脂培養(yǎng)基  250g

RNF166  環(huán)指蛋白166抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-TRADD(Ser269)  磷酸化瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

JMJD2A/KDM4A/JHDM3A  組蛋白去甲基化JMJ2A抗體 規(guī)格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA  核突觸蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1ml

AT1R/AGTR1  管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

ATE1  氨酸t(yī)RNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.2ml

H5N1 Matrix Protein 2  A型禽毒H5N1-M2蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

CD8B  CD8β鏈(CD8-β)抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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