當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研抗體>>抗體抗原>> 0.1ml/100μgAnti-Phospho-ARaf(Ser299)抗體
中文名稱 | 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 | 貨號 | GOY-01K65220 |
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規格 | 0.1ml/100μg |
別 名 p-Raf-1(Ser338/Tyr340);RAF1; murine leukemia viral (v-raf-1) oncogene homolog 1 (3611-MSV); v-raf-1 murine leukemia viral oncogene homolog 1; cRaf; C-RAF; proto-oncogene c-RAF; 6430402F14Rik; AA990557; BB129353; c-Raf; Craf1; D830050J10Rik;
產品名稱 | 中文名稱 | 貨號 |
Anti-Phospho-ARaf(Ser299)抗體 | 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 | GOY-01K65220 |
英文名稱 Anti-Phospho-ARaf(Ser299)
中文名稱 磷酸化原癌基因c-Raf抗體
濃 度 1mg/1ml
規 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 細胞生物 染色質和核信號 神經生物學 信號轉導 細胞凋亡 細胞周期蛋白 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 細胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight: 73kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human c-Raf around the phosphorylation site of Ser338/Tyr340
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存條件 Store at -20 °C for one year.
含試劑:
1、一抗(應用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:標記二抗工作液:標記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
實驗前準備:
安裝步驟與維護一)一抗稀釋的準備:
方法1. 實驗前,將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋(或PBS稀釋),將稀釋后的抗體分裝5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反復凍溶。
方法2. 實驗前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul(或PBS稀釋50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 預試驗可做幾個梯度1:100、200、400背景高還可做上去,選一個適合的稀釋比例,再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。
二)DAB顯色液的制備實驗準備:在1毫升試劑E(DAB 底物液)中,加入1滴(約50微升)試劑D(DAB濃縮液),混合均勻,即配成DAB工作液。此溶液必須現用現配,配好后避光保存,6小時內使用,剩余的液體應棄去。標本顯色時間一般為室溫 5~20分鐘,請在顯微鏡下觀察顯色的情況,顯色充分后應將標本及時脫水封固。
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復,在此步驟后進行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進行復染,脫水,透明。
14、選擇適當的封片劑封片。
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