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大鼠破骨細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 08:28:55瀏覽次數:167次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0988
大鼠破骨細胞公司正在出售的產品:33390-42-01,3,5,8-四羥基-2,4-雙(3- 規格: HPLC≥98%;20mg
6989-38-4吳茱萸內酯 規格: 20mg
74805-92-8麥冬甲基黃烷A 規格: HPLC≥98%,10mg
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公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠破骨細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0988

商品介紹:

名稱 大鼠破骨細胞

2.組織來源:骨髓

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠破骨細胞分離自骨組織和骨髓;破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞,位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統,其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡,若失去這種平衡則發生病理性變化。因此多數學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結構、功能探討骨吸收,形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞,屬于不增殖細胞群,不能增殖和傳代,只能進行原代培養且存活時間較短。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠破骨細胞采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠破骨細胞TRAP染色檢測,純度可達30%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R088

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態多核、巨細胞

傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

100mL TES Buffer,0.2M,pH8.0  TES Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Fms-related tyrosine kinase 3 ligand

100µL 小鼠抗E2標簽單抗 Anti E2-Tag Mouse MAb -20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人松弛肽2(RLN2)ELISA試劑盒

2 ug pTALEN_v2 (NN) pTALEN_v2 (NN) 低溫運輸,-20℃保

大鼠破骨細胞MAP3K7IP3  NFKB激活蛋白1抗體 規格: 0.1ml

MRP9/ABCC12  多藥耐藥相關蛋白9抗體 規格: 0.2mlProtein G  重組蛋白G抗體 規格: 0.1ml

SRF/SAP2/MCM1  生激素釋放因子抗體(清應答因子) 規格: 0.2ml

ZPI/SERPINA10  蛋白抑制劑A10抗體 規格: 0.2ml

CDK9/Cyclin T1  周期素依賴性激9抗體 規格: 0.1ml

HRP2  肝衍生生因子2抗體 規格: 0.2ml

C5orf35  5號染色體開放閱讀框35抗體 規格: 0.2ml

RBR2/Rb2 p130  視網膜母細胞瘤樣蛋白2抗體 規格: 0.2ml

20L 半干法電轉液(干粉) Half-Wet Transfer Buffer Powder 4℃保存

2 ug pLVX-AcGFP1-C1 pLVX-AcGFP1-C1 低溫運輸,-20℃保存

葡萄糖酪胨瓊脂 Dextrose Casein-peptone Agar 250g

250U 核酸內切 V Endonuclease V -20℃保存

 


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