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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 雞卵泡基膜細胞

雞卵泡基膜細胞

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 09:59:18瀏覽次數(shù):168次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01X0678
雞卵泡基膜細胞公司正在出售的產(chǎn)品:250mL Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4% Para-formaldehyde in PBS with Mg++ and EGTA,4% 常溫保存5nmol 接頭DNA(Sal I-Sma I) Adaptors -20℃保存2 ug pMXs-IRES-GFP pMXs-IRES-GFP 低溫

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

公司細胞現(xiàn)貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產(chǎn)品名稱

雞卵泡基膜細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0678

商品介紹:

名稱 雞卵泡基膜細胞

2.組織來源:雞卵泡組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

雞卵泡基膜細胞分離自雞卵泡組織;成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,卵泡腔很大,卵丘很明顯。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層,與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔,內膜細胞呈多邊形,胞質清亮,胞核圓形,細胞間可見許多毛細血管,外膜細胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,在卵泡開始發(fā)育、卵細胞成長的同時,周圍的菱形細胞變?yōu)榱⒎叫危⒂蓡螌釉錾蓮蛯樱蚱浼毎麧{內含有顆粒,故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級卵泡的顆粒細胞增至復層;成熟卵泡的顆粒細胞展開又變?yōu)閱螌印nw粒細胞的胞核大而圓,著色深,細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部。

5.方法簡介:

()實驗室分離的雞卵泡基膜細胞采用先機械分離后膠原酶反復消化法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的雞卵泡基膜細胞經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-C002

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標簽)

重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白

重組人 CCL11 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標簽)

重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL21 / 6Cki

雞卵泡基膜細胞50T 布魯氏菌PCR試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

2 ug pTYB 11 pTYB 11 低溫運輸,-20℃保存

100mg 5-溴-2'-脫氧尿苷 5-Bromo-2’-Deoxyuridine -20℃保存

ASZ1  錨定蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Avidin/Bio  標記的兔抗親和素 規(guī)格: 0.1ml

phospho-CDC27/ANAPC3(Thr244)  磷酸化后期促進復合蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

CCP  瓜氨酸環(huán)肽抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-11  白介素11抗體 規(guī)格: 0.1ml

Follistatin  卵泡抑素抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-EGFR (Tyr998)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

L-Citrulline  L-瓜氨酸抗體 規(guī)格: 0.2mgABHD13  水解結構域蛋白13抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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