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成骨細胞

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 09:20:28瀏覽次數:161次

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貨號 GOY-01X1038
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產品名稱

成骨細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1038

商品介紹:

名稱 成骨細胞

2.組織來源:顱骨組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

成骨細胞分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。

5.方法簡介:

()實驗室分離的人成骨細胞采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的人成骨細胞ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-H111

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

1瓶 C1.Ly1+2-/9細胞株 C1.Ly1+2-/9 低溫運輸和保存 15.62-1000 pg/mL 人轉導蛋白β鏈3(GNB3)ELISA試劑盒

50mL RIPA Buffer,5X  RIPA Buffer,5X  常溫保存 78-5000 pg/mL 人髓系細胞觸發受體2(TREM2)ELISA試劑盒

1 管 DB3.1大腸桿菌 DB3.1 E.coli Strain -80℃保存 15.62-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Inorganic pyropho

成骨細胞RPL19  核糖體蛋白L19抗體 規格: 0.2ml

PCID1  PCID1蛋白抗體 規格: 0.2ml

CD74/MHC II  CD74抗體 規格: 0.1ml

β-catenin  β-連環蛋白/β-連環素/β鏈接素抗體 規格: 0.1ml

2 ug pPICZ B(Zeocin)批號2 pPICZ B(Zeocin)批號2 低溫運輸,-20℃保存

馬尿酸鈉(軍團菌)  20支/盒

2 ug pET-9a pET-9a 低溫運輸,-20℃保存

50mL Denhardt’s Solution,100X  Denhardt’s Solution,100X  常溫保存

3%NaCl阿拉伯糖  20支

1瓶 BCaP-37細胞株 BCaP-37 低溫運輸和保存

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgM 規格: 0.1ml

5次 DAB法雜交試劑盒  

 


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