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測定意義

S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，是土壤硝態氮還原的關鍵酶。研究S-NR的活性對合理施肥，降低氮素的損失具有重要意義。

測定原理

S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；產生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下，與對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法測定。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

化內質網核信號轉導蛋白a1抗體Human RHOB ELISA Kit槐米

白介素28受體抗體Human RHEB ELISA Kit寬葉纈草

KB抑制蛋白激Ζ抗體Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit

胰島素基因增強結合蛋白1抗體Human RFXAP ELISA Kit硝基呋喃酰（呋喃丙雜質A）

整合素β1結合蛋白2抗體Human RGMA ELISA Kit

線粒體翻譯起始因子3抗體Human RGS11 ELISA Kit小鼠骨橋素(OPN)Elisa測定試劑盒

白介素27β抗體Human RFC3 ELISA Kit小鼠催乳素(PRL)Elisa測定試劑盒

胰島素樣生長因子1受體抗體Human RGR ELISA Kit雞B因子(BF)Elisa測定試劑盒

土壤硝酸還原酶（SNR）微量法檢測試劑盒胎兒纖連蛋白(fFN)免疫試劑盒現貨供應

小鼠肌醇3激(PI3K)免疫試劑盒進口、分裝

柯薩奇病毒IgA(Cox V-IgA)免疫試劑盒*直銷

小鼠白介素12(IL-12/P40)免疫試劑盒*直銷

小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒進口、組裝

豬Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒進口、組裝

5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgA)免疫試劑盒進口、組裝

魚白介素4(IL-4)免疫試劑盒*直銷

大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒*直銷

大鼠胃泌素(Gastrin)免疫試劑盒進口、組裝

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。