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菌種的培養：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業發酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種，用無菌手續挑取少許，接入瓊脂斜面培養基上，在25℃（或較高溫度）下培養5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數采用大米、小米之類的天然培養基）。

5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養基上，于25～28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子，如赤霉素產生菌或產孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養基的濃度不宜過高，營養成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種，則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

髓質素蛋白(N端20肽)Anti-ADGRE4P Antibody水防風Water wind

晚期糖基化終末產物AGEsAnti-ADGRF4 Antibody厚樸Magnolia officinalis

晚期糖基化終末產物蛋白對照品Anti-ADGRF4 Antibody白土苓（華南肖菝葜）Clay?Ling?（Southern China?Heterosmilax）

內皮素-1（蛋白多肽 活性蛋白）Anti-ADGRF3 Antibody地瓜藤Sweet potato vine

粘附多肽GRGDSAnti-ADGRF3 Antibody薯莨Dioscorea cirrhosa

腺苷酸環化激活肽 1-38（全蛋白）Anti-ADGRF5 Antibody花椒（青椒）Pepper?（pepper）

髓鞘堿性蛋白(多肽抗原)Anti-ADGRF5 Antibody麥芽Malt

囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽Anti-ADGRG1 Antibody川西獐牙菜Swertia mussotii Franch

門多薩假單胞菌天然 Nature,≥50% (HPLC)人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒類因子域7抗體NHEDC2  線粒體鈉/氫交換蛋白質2抗體

天然 Nature,≥95% (HPLC)人1型1-鞘氨受體(S1P1)免疫試劑盒α彈性蛋白抗體NHE1/APNH1  鈉氫通道蛋白抗體

α-藏花素 分析標準品，≥98%人17-酮類固(17-KS)免疫試劑盒黃熱病包膜糖蛋白抗體NGX6  鼻咽癌相關因6抗體

硫黃連堿 分析標準品，≥95%人17-羥孕烯酮免疫試劑盒HER2受體抗體NGN3/Neurogenin 3  神經元素3抗體

輪環藤堿 分析標準品，≥98%人17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒轉錄因子E2F-4抗體NGN1/Neurogenin 1  神經元素1抗體

蝙蝠葛堿 分析標準品，≥98%人17羥皮質類固(17-OHCS)免疫試劑盒化因子受體抗體NGF-β  神經生長因子β抗體

哈巴俄甙  分析標準品，≥98%人17-α-羥化(17-α-OH)免疫試劑盒化因子受體抗體NGFR/p75NTR  神經生長因子受體抗體

異鉤藤堿 分析標準品，≥98%人16α羥雌酮1(16-α OHE-1)免疫試劑盒化因子受體抗體NGB/neuroglobin  腦紅蛋白/神經血紅蛋白/神經球蛋白抗體

異綠原B 分析標準品，≥98%人15-羥前列腺素脫氫(15-PGDH)免疫試劑盒化埃茲蛋白抗體NGALR/Slc22A17  可溶性載質轉運蛋白22A17抗體

異蓮心堿 分析標準品，≥98%人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒化埃茲蛋白抗體NGAL/Lipocalin 2  脂質運載蛋白抗體

蒙花苷  分析標準品，≥98%人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫試劑盒化轉錄因子ELK1抗體NG2/CSPG4  黑色素瘤硫軟骨素蛋白多糖4抗體

木蘭脂素 分析標準品，≥98%人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)免疫試劑盒化酪氨蛋白激A2受體抗體NG2  硫軟骨素蛋白多糖4/黑色素瘤相關蛋白抗體

蓮心堿 分析標準品，≥98%人12羥二十烷四烯(12-HETE)免疫試劑盒Ephrin B抗體NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373)  化核因子p50/k因結合核因子抗體

鹽巴馬汀 97% 人11-脫氧皮質免疫試劑盒化Ephrin B抗體NFX1  核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體

鹽巴馬汀 分析標準品人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫試劑盒化Ephrin B抗體NF-M/Neurofilament M  中分子量神經絲蛋白抗體

微生物菌種的培養：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養基，培養基中含有一些適合產孢子的營養成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。面的培養溫度大多數為28 ℃，少數為37 ℃，培養時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25～28 ℃，培養時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃，子瓶培養基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經培養后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉入發酵罐內發酵，稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內，經過培養形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發酵罐內發酵，稱為三級發酵。同樣道理，使用三級種子的發酵，稱為四級發酵。