保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長(zhǎng)基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過(guò)擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過(guò)程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無(wú)菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長(zhǎng)時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對(duì)于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長(zhǎng)、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無(wú)機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無(wú)雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級(jí)種子，把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

BOC-β- 98%胰蛋白（豬胰臟） 1：250Anti-S100A13/FITC  熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A13抗體IgG

叔丁氧羰基-L-天冬-4-叔丁酯  99%氯化亞銅 AR，97%Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236)/FITC  熒光素標(biāo)記化S6核糖體蛋白抗體IgG

N-叔丁氧羰基-L-谷5-芐酯 97%氯化亞銅 CP，93%Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) /FITC  熒光素標(biāo)記化S6核糖體蛋白抗體IgG

N-Boc-L-天冬-5-叔丁酯 98%氯化亞銅 99.999% metals basisAnti-S100B/FITC  熒光素標(biāo)記S100B蛋白抗體IgG

BOC-D-谷5-叔丁酯 98%氯化亞銅 ≥99.95% metals basisAnti-S6PDH/FITC  熒光素標(biāo)記抗6-山梨脫氫抗體IgG

Boc-組 99%槲皮素,二水 97%Anti-SAMDC/AMD1/FITC  熒光素標(biāo)記S-腺苷蛋脫羧抗體IgG

Boc-D-異亮 98%槲皮素 97%Anti-SARS S-protein/FITC  熒光素標(biāo)記非典病表面蛋白S抗體IgG

N-叔丁氧羰基-賴甲酯 98.5%槲皮素,二水 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% (HPLC)Anti-SARS putative orflab polyprotein/FITC  熒光素標(biāo)記SARS抗體IgG

玖紅穗狀霉4- 99%小鼠高靈敏度促狀(U-TSH)免疫試劑盒白抗原B相關(guān)轉(zhuǎn)錄蛋白5抗體SLC40A1  膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體

4- ≥99%, FCC, Kosher小鼠高爾蛋白73(GP-73)免疫試劑盒BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白1（型肝炎病的NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8）抗體SLC39A7  轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族39成員7抗體

麥芽酚 99%小鼠高半胱氨(Hcy)免疫試劑盒BCL7B蛋白抗體SLC39A6  SLC39A6抗體

麥芽酚 99%,FCC,FG小鼠肝脂(HL)免疫試劑盒堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)抗體SLC39A11  溶質(zhì)載體家族39成員11抗體

二氫茉莉酮酯 96%小鼠肝臟型脂肪結(jié)合蛋白(L-FABP)免疫試劑盒B白血病/淋巴瘤蛋白7抗體SLC37A4/G6PT2  葡萄糖-6轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體

對(duì)氧 98%小鼠肝生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)免疫試劑盒先天性脂肪代謝障礙蛋白2抗體（常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17）SLC34A2  鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體

庚炔羧酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG小鼠肝生長(zhǎng)因子激活物(HGFAC)免疫試劑盒B遷移因1抗體SLC33A1  乙酰輔A轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

庚炔羧酯 98%小鼠肝生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1抗體SLC30A3/ZNT3  溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運(yùn)3抗體

鄰氨酯 99%小鼠甘油三酯(TG)免疫試劑盒B7H6蛋白抗體SLC2A4RG/GLUT4 enhancer factor  葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體

鄰氨酯 ≥98%, FCC,FG小鼠甘油-3-脫氫(GAPDH/G3PDH)免疫試劑盒B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體SLC29A4  腦質(zhì)膜單轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體

2-丁乙酯 99%小鼠干因子/肥大生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒橋連整合因子蛋白抗體SLC27A6/ACSVL2  脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體

2--1--2- 99%小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒BADH2抗體(水稻)SLC27A5  脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體

2-壬炔酯 98%小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子5(IRF5)免疫試劑盒丁酰酯單克隆抗體SLC27A2/ACSVL1  長(zhǎng)鏈脂肪輔A連接抗體

2-壬炔酯 Kosher, ≥99%小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)免疫試劑盒化β 連環(huán)素蛋白抗體SLC27A1  長(zhǎng)鏈脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體

2--1--2- ≥97%小鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒β-球蛋白抗體Slc26a5  感覺(jué)神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體