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當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 13:15:41瀏覽次數:158次

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原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X1130
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細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1130

商品介紹:

名稱 小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞

2.組織來源:胎盤組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育,依靠胎盤從母體取得營養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質的交換,這樣的結構稱假胎盤。絨毛膜是由滋養層和胚外中胚層的壁層構成。胚泡植入子宮內膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細胞滋養層為中軸,外裹合體滋養層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內形成血管網和結締組織,并與胚體內的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養層細胞形成細胞滋養層殼。隨著胚胎發育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

5.方法簡介:

()實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞采用-DNA酶聯合消化法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞Cytokeratin-7免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M144

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

改良愛德華瓊脂基礎 Edwards Medium,Modified 250g 1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Vitamin B1

100mg  Cytochrome C -20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Switch-associated protein 70

50T 腸道病毒EV71 PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human S-adenosy

小鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞1mL 鮭魚精DNA溶液(10mg/mL) Salmon Sperm DNA Solution -20℃保存

MLK3/RHOE  /蛋白激MLK3抗體 規格: 0.1mlSYP p38/Synaptophysin/SAP-1  突觸素抗體/突觸相關蛋白-1 規格: 0.1ml

Calcium Sensing Receptor/CaSR  鈣敏受體1抗體 規格: 0.2mlST5/DENND2B  抑蛋白5抗體 規格: 0.2ml

5g 4- 氯 -1- 萘 4-Chloro-1-Naphthol(4-CN) -20℃保存

PPIL1  親環素相關蛋白1抗體 規格: 0.2ml

Goat Anti-rabbit IgG  羊抗兔IgG 規格: 1mg

RNF44  環指蛋白44抗體 規格: 0.2ml

phospho-ALK/CD246(Tyr1604)  磷酸化間變型激抗體 規格: 0.1mlMMP-9  基質金屬蛋白-9抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgM/RBITC  羅丹明標記的兔抗雞IgM 規格: 0.3mlRPS3  核糖體蛋白S3抗體 規格: 0.2ml

ACCSL  ACCSL蛋白抗體 規格: 0.2ml

MOG  髓鞘少樹突膠質細胞糖蛋白抗體 規格: 0.1ml

Sertad1  調控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體 規格: 0.1ml

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