細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞：NCI-H23 

別稱NCI.H23; NCI H23; H23; H-23; NCIH23

種屬人類

年齡（性別）男性，51歲

組織來源肺

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述NCI-H23細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織，表達(dá)C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erbB、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；NCI-H23細(xì)胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達(dá)PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達(dá)TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經(jīng)絲蛋白陰性，脫氫酶陰性；據(jù)報(bào)道，NCI-H23細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆的效率為9.7%。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~38小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況myc+; src+; abl+; erb+; ras+; sis -

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

人 STX7 / Syntaxin 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 NPDC-1 / NPDC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 FAIM3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 BTN3A3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 LRG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 Hexosaminidase B / HEXB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

人

非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞：NCI-H23 100U β-瓊脂糖Ⅰ β-AgaraseⅠ -20℃保存

250mL Acetate Buffer（乙酸緩沖液），1M,pH3.0   Acetate Buffer，1M,pH3.0   常溫保存

PACAP-27/38  苷酸環(huán)化激活肽-27/38抗體 規(guī)格: 0.1ml

FGL2  凝原(纖維介素)抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRKCA(Ser657+Tyr658)  磷酸化蛋白激C抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-PAK4(Ser99)  磷酸化p21激活激4抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-IGF1R(Tyr1165+Tyr1166)  磷酸化胰島素樣生因子1受體抗體 規(guī)格: 0.1mlARMCX1  ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRKCQ(Thr538)  磷酸化蛋白激C theta抗體 規(guī)格: 0.1ml

NCoR1  核受體輔助抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.1ml

APPD/LAPF  凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體 規(guī)格: 0.2ml

CYLD  微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 規(guī)格: 0.1ml

Activin A Receptor Type IB  激活素受體1B抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-PRKCB(Ser642)  磷酸化蛋白激C抗體 規(guī)格: 0.1mlANKS6  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml