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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達(dá)10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多，有些可添加保護(hù)劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

羥基纖維素 II型，粘度：100mPa.s可溶性淀粉 ARphospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  化核因子/化k基因結(jié)合核因子抗原

羥基纖維素 II型，粘度：400mPa.s水溶性淀粉 水溶性,藥用級NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原

羥基纖維素 II型，粘度：4000mPa.s二氧化硅 輕質(zhì)AR,99.5%NGN3(neurogenin 3; Neurog3)  神經(jīng)元素3抗原

羥基纖維素 II型，粘度：15000mPa.s二氧化硅 99.99% metals basis,粒徑:5μmNGX6 (nasopharyngeal carcinoma/NPC associated gene 6)  鼻咽癌相關(guān)基因6（多肽）

羥基纖維素 II型，粘度：100000mPa.s二氧化硅 GRNIT2 (nitrilase family, member 2)  NIT2蛋白抗原

羥基纖維素 2%粘度3mPa.s;甲氧基28-30%;羥基7.0-12%二氧化硅 99.9% metals basisNKA(Neurokinin A)  神經(jīng)激肽A抗原

羥基纖維素 M.W. 100,000 十二烷基鈉 Ph. Eur，USP級，92%NKG2A/CD159a/KLRC1  NK受體2A/自然傷活化性受體2A抗原

苯甲 無水級, 99.8%辛酰氯 99%NKG2D(natural killer cell group 2D)  NK受體/自然傷活化性受體

多頭霉馬心肌紅蛋白相對分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 馬心肌紅蛋白:16951Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3) ELISA Kit  小鼠周期素D3豚鼠谷轉(zhuǎn)氨(ALT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.7%Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit  小鼠周期素D2豚鼠通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

無機(jī)元素混合溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Al、Ca、K、Na、Pb、Se:1.00μg/mL;AsE(Mouse estrogen) ELISA Kit  小鼠雌激素豚鼠肌球蛋白輕鏈1(MYL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

無機(jī)元素混合溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;AsCyclin-D1(Mouse Cyclin-D1) ELISA Kit  小鼠周期素D1豚鼠癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

無機(jī)元素混合溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;AsMBP(Mouse myelin basic protein) ELISA Kit  小鼠髓脂堿性蛋白豚鼠趨化因子C-C-元配體1(CCL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

一砷溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 0.335μmol/gTGF- Alpha(Mouse transforming growth factor Alpha) ELISA Kit  小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α豚鼠血漿過氧化物(GPX3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 99.9％AFP(Mouse Alpha-fetoprotein) ELISA Kit  小鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白豚鼠膠原I(Collagenase I)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml，體：PAP(Mouse Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit  小鼠前列腺性豚鼠速激肽受體3(TACR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

萘標(biāo)準(zhǔn)溶液 51.7μg/mL，體：PSA(Mouse prostate specific antigen) ELISA Kit  小鼠前列腺特異性抗原豚鼠粘蛋白20(MUC20)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

98%(Mouse ovarian cancer marker-CA125) ELISA Kit  小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125豚鼠前列腺素E合2(PTGES2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

除草 分析標(biāo)準(zhǔn)品(Mouse mammary carcinoma Marker-CA153) ELISA Kit  小鼠癌標(biāo)志物-CA153豚鼠肌腱蛋白C(TNC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

除草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%(Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit  小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199豚鼠間隙連接蛋白β1(GJβ1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

鎳標(biāo)準(zhǔn)溶液 100(20℃)μg/mL，體:1%HNO3HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit  小鼠血紅素氧合1豚鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硝根離子(NO5-)標(biāo)準(zhǔn)溶液1000μg/ml,溶劑:水PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit  小鼠脂A2豚鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

硝根離子(NO6-)標(biāo)準(zhǔn)溶液100μg/ml,溶劑:水TFPI(Mouse Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit  小鼠組織因子途徑抑制物豚鼠過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。