選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

血磷主要指血中的無機磷，以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切，在以mg/dL表示時，二者的乘積(［Ca］×［P］)為30～40。當(［Ca］×［P］)>40，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織；若(［Ca］×［P］)<35則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調節。

測定原理：

去除血清中有機磷后，無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被還原后呈藍色，在620nm有光吸收；通過測定620 nm吸光度，計算血液中磷含量。

自備儀器和用品：

離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。

實驗方法學：

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

1-萘鹽酸鹽 AR磺氯吡 分析標準品Anti-p58ipk/FITC  熒光素標記p58ipk抗體IgG

1-萘鹽酸鹽 99%磺氯吡Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC  熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG

核固紅 AR2,3-二氟苯甲 97%Anti-p70 S6 Kinase/P70 Beta1/FITC  熒光素標記p70S6Kb抗體IgG

核固紅 Biological stain2,3-二氟苯甲酸 98%Anti-P73 protein/FITC  熒光素標記P73腫瘤抑制基因抗體IgG

偏 AR惡霉靈 分析標準品，99.8%Anti-Phospho-p73 (Tyr99) /FITC  熒光素標記化P73腫瘤抑制基因抗體IgG

酚藏花紅 80%2-溴苯乙烯 97%,含0.1%對叔丁基鄰苯二酚(TBC)穩定劑Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC  熒光素標記核糖體S6蛋白激β2抗體IgG

藍五號鈉鹽 80%5-乙酰酸鹽酸鹽 99%Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC  熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG

四苯 99%土木香內酯 分析標準品，≥97%(HPLC)Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC  熒光素標記化P63腫瘤抑制基因抗體IgG

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