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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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胚腎細(xì)胞:AAV-293

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-06 09:58:53瀏覽次數(shù):150次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X0019
胚腎細(xì)胞:AAV-293 公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pYES6/CT pYES6/CT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存50次 λ噬菌體DNAout 2 ug pAAV-helper pAAV-helper 低溫運(yùn)輸,-20℃保存7%羊血瓊脂基礎(chǔ) 7%Sheep Blood Agar Base 250g1瓶 4T1細(xì)胞株 4T1 低溫運(yùn)輸和保存

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

分類

貨號(hào)

胚腎細(xì)胞:AAV-293 

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞系

GOY-01X0019

產(chǎn)品介紹:

名稱    胚腎細(xì)胞:AAV-293 

別稱AAV293

種屬人類

年齡(性別)胎兒

組織來源腎;以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述AAV-293細(xì)胞源自普遍使用的293 [HEK-293]細(xì)胞株,但AAV-293細(xì)胞產(chǎn)生的病毒滴度更高。293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。跟293 [HEK-293]細(xì)胞一樣,AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒、pAAV-RC和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí),AAV-293細(xì)胞可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒;因此,我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。

生物安全等級(jí)2

生長培養(yǎng)基DMEM+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

注意事項(xiàng)該細(xì)胞貼壁松散,操作時(shí)請盡量輕柔;換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正常現(xiàn)象,請按照收貨注意事項(xiàng)處理。

處理方法:

收到細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題,請即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基(含10%胎牛血清,1%雙抗)。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(40×,100×,200×各一張)。

5. ①若細(xì)胞密度較小,無菌操作,去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,進(jìn)行傳代。88.jpg

實(shí)驗(yàn)操作步驟:  

a.采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b.立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70%乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c.用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口,用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d.用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部,取出含有胚胎的子宮,置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e.剔除胚胎周圍的包膜,將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f.漂洗胚胎,去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng):

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):

1.研究的對象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;

適用的對象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

 


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