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上海谷研實業(yè)有限公司
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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 兔子宮成纖維細胞

兔子宮成纖維細胞

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 13:07:39瀏覽次數(shù):213次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養(yǎng)
貨號 GOY-01X0816
兔子宮成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:2 ug pCEP4(附加體形式) pCEP4(附加體形式) 低溫運輸,-20℃保存沙氏葡萄糖瓊脂(USP) Sabouraud Dextrose Agar Medium 250g10g 茚三酮 Ninhydrin 室溫避光保存50T 禽結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存1 mg Indo-1 AM Fluorescent Probe and

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

兔子宮成纖維細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0816

商品介紹:

名稱 兔子宮成纖維細胞

2.組織來源:子宮組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

兔子宮成纖維細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。子宮成纖維細胞的主要特征:是子宮的重要細胞組成,在體外易于培養(yǎng);在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮;在子宮炎癥時能有效控制炎癥擴散。

5.方法簡介:

()實驗室分離的兔子宮成纖維細胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

()實驗室分離的兔子宮成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-Rb033

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

10000U T3 RNA聚合 T3 RNA Polymerase -20℃保存 0.078-5 ng/mL ELISA Kit for Human Kynurenine/alpha-aminoadipate aminotransferase, mitochondrial

250mL Phosphate Citrate Buffer,2X  Phosphate Citrate Buffer,2X  常溫保存 0.156-10 ng/mL 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

25

兔子宮成纖維細胞Phospho-PIM1(Tyr218)  磷酸化前毒整合位點蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

利茲不動桿菌培養(yǎng)基 Leeds Acinetobacter Medium 250g

phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70)  磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

phospho-RGS19(Ser22)  磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格: 0.1ml

streptomycin  鏈霉素抗體 規(guī)格: 0.2mlCYP11B1  細胞色素P450 11B1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Aurora B/STK-1  有絲分裂激B抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-PPAR alpha(Ser12)  磷酸化α型-過氧化活化增生受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

50mL 苯基介質(zhì) Pheny Medium 常溫保存

2 ug pHis pHis 低溫運輸,-20℃保存

3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基 3% NaCl MR-VP Medium 20支

25mg 噻苯隆 Thidiazuron(TDZ) 室溫干燥保存

125mL Phosphate Buffered RIPA,2X Phosphate Buffered RIPA,2X 常溫保存

麥康凱瓊脂2號 Maconkey Agar No.2 250g

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