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測定意義

DBE能夠專一性地裂解支鏈淀粉的α-1，6糖苷鍵，產生線性的葡萄糖鏈，在調整支鏈淀粉分子的鏈長方面有重要的作用。

測定原理

采用3，5-二硝基水楊酸法測定DBE催化支鏈淀粉產生的還原糖，通過測定還原糖含量的變化來計算DBE活性。

需自備的的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

人縮Bacillus coagulans色素P4502E1檢測試劑盒

人L-乳酸脫氫Bacillus coagulans色素P450c21A;21-羥化檢測試劑盒

人酸性神經鞘磷脂Bacillus coagulans外基質金屬蛋白誘導因子檢測試劑盒

人花生四烯酸5脂加氧Bacillus coagulans外基質糖蛋白檢測試劑盒

人5脂加氧Bacillus cohnii外信號調節激檢測試劑盒

人腺苷酸環化1Paenibacillus ehimensis外信號調節激檢測試劑盒

人可溶性腺苷酸環化Bacillus diffusus纖維連接蛋白檢測試劑盒

人脫羧Bacillus firmus因子信號轉導抑制因子1檢測試劑盒

淀粉脫分支酶（DBE）可見分光光度法檢測試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒*直銷

大鼠白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒進口、組裝

小鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒*直銷

大鼠β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒*直銷

基質金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒現貨供應

大鼠孕酮受體(PROGR)免疫試劑盒進口、組裝

抗卵巢抗體(AOAb)免疫試劑盒進口、分裝

甘肽過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒進口、分裝

干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒進口、組裝

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。