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小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞:bEnd.3(BEND3)

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-10 16:55:37瀏覽次數(shù):185次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X0584
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞:bEnd.3(BEND3)公司正在出售的產(chǎn)品:10管 穿刺培養(yǎng)基 Stab Medium 4℃保存2 ug pPIC 6C pPIC 6C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存雙岐桿菌生化試驗(yàn)無(wú)糖對(duì)照 20支2 ug pBoBi pBoBi 低溫運(yùn)輸,-20℃保存無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基(不含瓊脂)(測(cè)磷細(xì)菌解磷效能) 250g

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞:bEnd.3(BEND3)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號(hào)

GOY-01X0584

商品介紹:

名稱 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞:bEnd.3(BEND3)

別稱bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3

種屬小鼠

年齡(性別)6周齡

組織來(lái)源大腦皮層

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述The cells were transformed by infection with the NTKmT retrovirus vector that expresses polyomavirus middle T antigen

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:4-1:6

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~24-32小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

抗原表達(dá)情況ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +

基因表達(dá)情況von Willebrand factor,ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +,The endothelial nature of these cells was confirmed by the observed expression of von Willebrand factor and uptake of fluorescently labeled low density lipoprotein (LDL).,The expression of Peyer's Patch high endothelial receptor for lymphocytes, the mucosal vascular addressin (MAdCAM-1) and E-selectin can be induced on bEnd

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 EPOR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 NTRK3 / TrkC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 TNFRSF19 / TROY 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

小鼠 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

IL22BP / IL22RA2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

IL18R1 / CD218a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

GP1Bβ / CD42c 人ows\system32\EhStorShell.dll

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞:bEnd.3(BEND3)PP1C gamma  蛋酸γ1抗體 規(guī)格: 0.1ml

IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11  干擾素α11抗體 規(guī)格: 0.2mlGPVI/Glycoprotein VI  糖蛋白VI/六糖蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

1.5mL 溴化乙錠溶液,10 mg/mL Ethidium Bromide Solution 4℃避光

Phospho-IRAK1 (Thr209)  磷酸化白介素-1受體相關(guān)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格: 0.1ml

TIAM1  T侵襲轉(zhuǎn)移誘導(dǎo)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CHRNB2  堿型乙酰受體B2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Bio  標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格: 0.3mlPRSS3  腦胰蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bov IgG/PE  PE標(biāo)記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.1mlPhospho-PLC gamma 1(Ser1248)  磷酸化磷酯Cγ1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C2orf43  2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.2ml

2 ug SD1211- 2 SD1211- 2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

GADD34  生抑制DNA損傷基因34抗體 規(guī)格: 0.1ml

 


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