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產品名稱:豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)elisa試劑盒
英文名稱:Porcine MBP ELISA Kit
規格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。?
具有如下優點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節省實驗經費。
試劑配制:
1、酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
冠蛋白6(CORO6)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforCoronin6(CORO6)
Kruppel樣因子15(KLF15)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforKruppelLikeFactor15(KLF15)
線粒體肌酸激酶1A(CKMT1A)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforCreatineKinase,Mitochondrial1A(CKMT1A)
白介素1β(IL1β)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforInterleukin1Beta(IL1b)
牙骨質蛋白1(CEMP1)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforCementumProtein1(CEMP1)
味覺受體1型成員2(TAS1R2)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforTasteReceptorType1Member2(TAS1R2)
神經源素1(NEUROG1)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforNeurogenin1(NEUROG1)
補體因子H(CFH)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforComplementFactorH(CFH)
多巴胺(DA)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforDopamine(DA)
氨酸氨肽酶(AAP)(酶聯免疫吸附試驗法) KitforAlanineAminopeptidase(AAP)
凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)(酶聯免疫吸附試驗法)
凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)(酶聯免疫吸附試驗法)
凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)(酶聯免疫吸附試驗法)
凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)(酶聯免疫吸附試驗法)
凝血因子Ⅺ(F11)(酶聯免疫吸附試驗法)
凝血因子Ⅺ(F11)(酶聯免疫吸附試驗法)
豬髓磷脂堿性蛋白(MBP)elisa試劑盒macrophage inflammatory protein 1α巨噬細胞炎性蛋白-1α種屬: Escherichia coli DH5α(pMA5)DH5α(含pMA5質粒)大腸桿菌
tartrate-resistant acid phosphatase抗酒石酸酸性磷酸酶種屬: Nisaea│denitrificans脫氮麗希亞女神菌
tartrate-resistant acid phosphatase 5b抗酒石酸酸性磷酸酶5b種屬: Alternaria│alternate互生鏈格孢
Anti-Mullerian hormone Receptor抗繆勒管激素受體種屬: Russula│mustelina Fr.赭蓋紅菇
Anti-Thrombin Ⅲ抗凝血酶Ⅲ種屬: Colletotrichum│hibisci木槿刺盤孢(紅麻炭疽病菌)
Soluble Cluster of differentiation 40 ligand可溶性CD40配體種屬: Curvularia│oryzae稻彎孢
soluble E-selectin可溶性E選擇素種屬: Salmonella│paratyphi B乙型副傷寒沙門菌
sP-selectin可溶性P選擇素種屬: Phycicoccus│bigeumensis飛禽島海藻球菌
Soluble Intercellular Adhesion Molecule 1可溶性細胞間粘附分子1種屬: Streptomyces│pentaticus五霉素輪絲鏈霉菌
soluble Thrombomodulin可溶性血栓調節蛋白種屬: Jeotgalicoccus│marinus海洋咸海鮮球菌
Cotinine可替寧種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pET28a/kasB
mammalian target of rapamyein雷帕霉素靶蛋白種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5a/pET30a/PasecA N75+
Granulocyte Colony Stimulating Factor粒細胞集落刺激因子種屬: Lactobacillus│kimchii韓泡菜乳桿菌
Crestine phosphokinase磷酸肌酸激酶種屬: Leeuwenhoekiella│palythoae按鈕息肉萊文虎克菌
keratan sulfate硫酸角質素種屬: Pestalotiopsis│cocculiPestalotiopsis cocculi
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