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貨號 | GOY-01X0328 |
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使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 咽頭癌胸水轉移細胞:Detroit 562 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
分類 | 細胞系 |
貨號 | GOY-01X0328 |
商品介紹:
名稱 咽頭癌胸水轉移細胞:Detroit 562 別稱DETROIT 562; Detroit-562; Detroit562; DETROIT562; Det 562; Det. 562; D562 種屬人類 年齡(性別)女性,成人 組織來源器官:咽頭;疾?。喊蝗〔霓D移灶:胸水 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述Detroit 562細胞角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 生物安全等級1 生長培養基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達情況keratin |
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
食蟹猴 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CRELD2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL1RL1 / Sows\system32\EhStorShell.dll
咽頭癌胸水轉移細胞:Detroit 562 TCF7L2 轉錄因子7類似物2抗體 規格: 0.1ml
Phospho-MDM2 (Ser166) 磷酸化雙微體2基因抗體 規格: 0.1ml
2 ug pCAMBIA1301 pCAMBIA1301 低溫運輸,-20℃保存
平板計數瓊脂(PCA)顆粒 Plate Count Agar 300ml/袋*10
1mL 蛋白抑制劑混合液1 Phosphotase Inhibitor Cocktail 1 4℃保存
2 ug PinPoint Xa-1 PinPoint Xa-1 低溫運輸,-20℃保存
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 250g
100U Red-Taq DNA聚合
2 ug pBBR1-MCS3 pBBR1-MCS3 低溫運輸,-20℃保存
季銨鹽類中和劑管 9ml*20
25g 甲叉雙丙烯酰胺 N,N’-Methylene Bisacrylamide(BIS) 室溫干燥保存
50次 菌落PCR試劑盒2.0 Colony PCR Kit 2.0 -20℃保存
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