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Bacillussubtilis

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更新時間:2022-04-15 14:22:48瀏覽次數:135次

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產品名稱

用途

貨號

Bacillussubtilis

僅供科研

GOY-01J7197

菌種的培養:

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業發酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經過擴大培養成為具有一定數量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續挑取少許,接入瓊脂斜面培養基上,在25℃(或較高溫度)下培養5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數采用大米、小米之類的天然培養基)。

5、將培養成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養基上,于25~28℃培養14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續使用半年左右。

6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
QQ截圖20220323162239.png

保存方法:

傳代保存法:培養基的濃度不宜過高,營養成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法:

① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發。

② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法:

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。

多巴受體D4抗體Human NIM1K (Serine/threonine-protein kinase NIM1) ELISA KIT亞鐵瓊脂用于肉和肉食產品中梭的計數(SN方法)

橋粒斑蛋白1抗體Human NEMF (Nuclear export mediator factor NEMF) ELISA KIT戊 烷脒加入戊烷脒多粘素瓊脂

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Bacillussubtilis二氧化鋯 AR,99.0%蛋白激C抗體Bestrophin 4  卵黃狀黃斑病蛋白4抗體

二氧化鋯 99.99% metals basis,50nm成對螺旋細絲蛋白抗體Bestrophin 3  卵黃狀黃斑病蛋白3抗體

氫氧化鋯 97%炎癥因子3抗體(穿透素)Bestrophin 2  卵黃狀黃斑病蛋白2抗體

氧化鋯,八水 99.9% metals basis山核桃素樣蛋白1抗體Bestrophin  卵黃狀黃斑病蛋白抗體

氧化鋯,八水 98%化α型-過氧化活化增生受體抗體BEND6  BEND6蛋白抗體

鋯粉 99.5% metals basis ((不包括鉿)),200 目原鈣粘蛋白γC5抗體BEND5  BEN結構域蛋白5抗體

甘油 Standard for GC,≥99.7% (GC) Rho鳥甘轉運蛋白抗體BEND4/CCDC4  BEND4蛋白抗體

甘油 AR,99%化蛋白激C亞性抗體BEND3  BEND3蛋白抗體

甘油 CP,97%化蛋白激C亞性D型抗體BEND2/CXorf56  BEND2蛋白抗體

甘油  ≥99.5%(GC)蛋白激C亞型G抗體BECN1L1  Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體

甘油 ACS, ≥99.5%化蛋白激C亞型G抗體BECN1/Beclin 1/ATG6  Bcl-2同源結構域蛋白抗體

甘油 色譜固定液化蛋白激C亞型G抗體BDNF  腦源神經營養因子抗體

甘油 for molecular biology, ≥99%肝再生酯1抗體Bdkrb2/B2R  緩激肽B2受體抗體

甘油 for cell culture, for insect cell culture, ≥99%(GC)酯3蛋白抗體BDKRB1  緩激肽B1受體抗體

甘油 for spectroscopy, ≥99.5%果糖-2,6-二心肌抗體BDH1  3-羥丁脫氫抗體

微生物菌種的培養:

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養環境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。

⑵ 霉菌孢子的制備 

霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備 

搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。

⑵ 種子罐種子制備 

種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。

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