產品屬性：

產品介紹：

名稱    小鼠心臟干細胞

2.組織來源：心臟組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

小鼠心臟干細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。研究發現，心臟干細胞是一種多潛能細胞，具有再生和克隆能力，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內皮細胞。體內研究顯示，從心臟中分離出的心臟干細胞，經體外簡單培養、增殖和標記后，移植到心肌梗死邊緣區域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善，心肌梗死邊緣區域發現有標記的心肌細胞、平滑肌細胞和內皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白、α-輔肌動蛋白、連接蛋白等，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內外可以分化成心肌細胞、血管內皮細胞和平滑肌細胞，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經成為目前研究的熱點。短期內獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應用于臨床的關鍵所在。因此，研究一種新的分離培養方法可在短時期內獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之一。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠心臟干細胞采用機械剪碎組織、膠原酶分次消化法結合差速貼壁、心臟干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的小鼠心臟干細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-M135

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態長梭形

傳代特性可傳2-3代左右

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

1 g HDAC抑制劑 Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 78-5000 pg/mL 人鱗狀細胞癌抗原1(SCCA1)ELISA試劑盒

100mL DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0  DIPSO Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存 0.312-20 ng/mL 人神經連接蛋白4,X連鎖(Neuroligin X)ELISA試劑盒

10mL 超級雜交液（Oligo探針） SuperHyb Solution for Oligo -

小鼠心臟干細胞TRPC6  瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體 規格: 0.1ml

BFSP2/Phakinin  晶狀體蛋白2抗體 規格: 0.2mlphospho-c-Raf(Ser296)  磷酸化原基因c-Raf抗體 規格: 0.1ml

PFK2/PFKFB3  6磷酸果糖激2抗體 規格: 0.2ml

Fascin1  纖維束1抗體 規格: 0.1ml

TEP1  端粒相關蛋白1抗體 規格: 0.2ml

phospho-IKK beta(S474)  磷酸化KB抑制蛋白激β抗體 規格: 0.1ml

phospho-IFNAR1(Ser535+Ser539)  磷酸化干擾素α受體抗體 規格: 0.1ml

phospho-RPA32/RPA2(Thr21)  磷酸化復制因子A蛋白2抗體 規格: 0.1ml

P14ARF/CDKN2A  抑基因p16抗體 0.1mlox-LDL  氧化脂蛋白抗體 規格: 0.1ml

SCN3B  電壓門控鈉通道SCN3B蛋白抗體 規格: 0.2ml

SRRM2  /氨酸相關核基質蛋白2抗體 規格: 0.2ml

200次 一管式病毒DNAout One-Tube Viral DNAOUT 常溫

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。