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小鼠骨保素Elisa Kit說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2019-03-19 16:11:43瀏覽次數:174次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
小鼠骨保素Elisa Kit說明書檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..

公司小鼠骨保素Elisa Kit說明書采用的全是進口原材料研,發靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。點擊了解更多小鼠elisa kit

產品名稱

英文名稱

規格

小鼠骨保素Elisa Kit說明書

 Mouse OPG ELISA Kit

48T/96T

小鼠骨保素(OPG)Elisa KitMouse OPG ELISA Kit
小鼠骨保素Elisa Kit說明書【實驗用途】骨保素(OPG)是一種分泌型糖蛋白,屬于TNF受體超家族成員,具有TNF受體超家族特征性的N端富含半胱氨酸區域,其分子結構與TNFR-2及CD40尤其相似,但它不含跨膜疏水區,小鼠OPG與人、大鼠的同源性分別為85%和95%,提示OPG基因在進化中的高度保守。OPG分子由401個氨基酸組成,N端21個氨基酸為信號肽,經糖基化后,成熟的OPG分子包含380個氨基酸,在胞內先形成55 ku的單體,隨后兩條肽鏈間的Cys400形成二硫鍵,以110 ku的同源二聚體形式分泌至胞外,每條OPG多肽鏈包含23個半胱氨酸,可形成9對二硫鍵,整個蛋白質分為7個結構域,并形成3個功能區:TNF受體結構區,包括結構域1~4,尤其是Cys185之前部分,是OPG主要的功能區域,執行抑制破骨細胞的功能;死亡域同源區5和6,與Fas蛋白跨膜區形成融合蛋白后具有很強的細胞毒性,可以引起細胞凋亡;肝素結合結構區,其作用尚不明確。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。


試劑配制:
1、小鼠骨保素Elisa Kit說明書酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1加樣:
小鼠骨保素Elisa Kit說明書實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
?現貨供應 卷曲同源物10(FZD10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 卷曲同源物2(FZD2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 卷曲同源物3(FZD3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 卷曲同源物4(FZD4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 卷曲同源物5(FZD5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 卷曲同源物6(FZD6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸X受體α(RXRα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸受體α(RARα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸受體α(RARα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸受體β(RARβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸受體γ(RARγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 維酸受體應答基因1(RARRES1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 脂多糖結合蛋白(LBP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 Gremlin 1蛋白(GREM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 丁酰膽堿酯酶(BCHE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 突觸融合蛋白2(STX2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 突觸融合蛋白1A(STX1A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

現貨供應 谷氨酸半胱氨酸連接酶催化亞基(GCLC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
小鼠骨保素Elisa Kit說明書* 黃芪皂苷III 規格: 10mg/支

* 丁香酚 規格: 0.5ml/支

* 黃楊堿 規格: 20mg/支

* 紅景天苷 規格: 20mg/支

* 絡塞琳 規格: 20mg/支

* 絡塞維 規格: 20mg/支

* 絡緦 規格: 20mg/支

* 絡塞定 規格: 20mg/支

* 槐果堿 規格: 20mg/支

* 花旗松素 規格: 20mg/支
操作步驟:
1)小鼠骨保素Elisa Kit說明書運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。

 

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