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當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光核酸試劑>> 5 g/25 gN-BOC-乙二胺 基因擴增儀

N-BOC-乙二胺 基因擴增儀

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號5 g/25 g

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-11-03 09:28:20瀏覽次數(shù):370次

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N-BOC-乙二胺實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

產(chǎn)品名稱:N-BOC-乙二胺

規(guī)格:5 g/25 g

貨號:BJP1263

分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。

運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

染料法

探針法 

可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等

實驗報告

·電泳圖   ·標準曲線 

·溶解曲線 ·擴增曲線

·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告

儲存條件:

14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法:

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。

?

檢測步驟:

一、 試劑的準備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:

試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:

由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;

商定服務(wù)收費、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。

客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

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N-BOC-乙二胺Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于L. buchneri MD-1的乳酸脫氫酶基因ldhD的表達培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Acremonium│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥

Clitocybe│maxima (Gartn. & G. Mey.) P. Kumm.分離基物: 子實體斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28存儲條件: 定期移植法

Debaryomyces│hansenii凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 20℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Bacillus│cereus分離基物: 口防風凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制沙門氏菌、抑制梨黑霉病原菌、抑制炭疽霉病原菌培養(yǎng)基: CM0003生長條件: 35-37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 死亡仔豬十二指腸凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;

Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 保存HIV gag的NC區(qū)基因,載體pcDNA3.1,N端Luc標簽培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 37C存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)

Neurospora│crassa凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: crisp培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Idiomarina│sp.分離基物: 鹽礦沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 444生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法

 

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