試劑配制:
1、人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說明書酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

人分泌型磷脂酶A2（sPLA2）Elisa KitHuman secretary phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說明書【實(shí)驗(yàn)用途】分泌型磷脂酶A2(secretary phospholipase A2,sPLA2-ⅡA)所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

操作步驟：
1）人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說明書運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項(xiàng)：
1加樣：
①人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說明書實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
公司人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說明書采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。點(diǎn)擊了解更多人elisa kit。
?現(xiàn)貨供應(yīng)　鳥氨酸脫羧酶抗酶1(OAZ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　鳥嘌呤脫氨酶(GDA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　饑餓素(GHRL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

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現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體融合素2(MFN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　組織因子(TF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　組織因子(TF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　組織因子(TF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

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現(xiàn)貨供應(yīng)　載脂蛋白B100(APOB100)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　載脂蛋白A2(APOA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　載脂蛋白A2(APOA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　載脂蛋白A2(APOA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　P選擇素(SELP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　層粘連蛋白α1(LAMα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T
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