試劑配制:
1、大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

大鼠核轉錄因子κB （NFκB）Elisa KitRat nuclear transcription factor-κB /NFκB ELISA Kit
大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌核轉錄因子κB (nuclear transcription factor-κB，NF-κB)，NF-kB，是一種蛋白質分子，其結構為一種體內的生物誘導分子(biological trigger)，是在體內許多疾病的生理作用上扮演了重要的角色，從癌癥到骨質疏松癥，再到細菌感染，皆與之脫離不了關系，NF-kB發現與哺動物的細胞，平時結合與另一分子--IkB，IkB使得NF-kB分子失去生物活性，當一組啟動信號啟動NF-kB后，IkB脫離NF-kB，NF-kB恢復活性，進入細胞核。NF-kB位于TLR下游信號通路的樞紐位置，當細胞受到生物應激刺激后激活NF-kB，活化的NF-kB進入細胞核調節炎性細胞因子的表達，啟動針對病原微生物的固有免疫和獲得性免疫。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

操作步驟：
1）大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌運用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發生加樣上的差錯。
2）依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定，能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3）參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷，洗刷次數添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應當即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項：
1加樣：
①大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復合物脫離；
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結果要在15-30 min內完成，定性測定用肉眼判讀試驗結果時，反應板應水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結果，酶標儀不應置于陽光或強光照射下，需先預熱15-30 min再進行測試。
公司大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌采用的全是進口原材料研，發靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。點擊了解更多大鼠elisa kit。
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大鼠核轉錄因子κB Elisa Kit品牌Neoandrographolide 新穿心蓮內酯27215-14-120mg

Galanthamine base 加蘭他敏357-70-020mg

Baicalin 黃芩苷21967-41-920mg

Potassium sorbate 山梨酸鉀24634-61-5100mg

Pentoxifylline 己酮可可堿1677687100mg

透析袋 扁寬18 截留分子量10000.5m/即用型管

方蓋玻片 24mm×24mm100片盒

Konjac glucomannan 魔芋膠100g瓶

BSTFA containing 1% TMCS N,O-雙(三硅烷基)三乙酰胺（含1%TMCS）25ml瓶

Calcium phytate 植酸鈣25g瓶

線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)100T盒

Food Yellow 3 日落黃25g瓶

Xanthione oxidase 黃嘌呤氧化酶5u瓶

Glycine 甘氨酸5000g瓶

通用反轉錄試劑盒(M-MLV，不含Taq酶)50T瓶

SABC-POD Kit(不含二抗)100-200T盒

HRP標記生物素1ml支

4×非變性蛋白上樣緩沖液10ml瓶