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可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2019-03-05 09:16:46瀏覽次數:210次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集細胞RNAwait的用量是1ml。

可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書的詳細介紹:

DNA提取流程圖:
?公司可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產品:點擊了解更核酸擴增
1、RNA純化系列產品
2、DNA純化系列產品
3、電泳及回收系列產品
4、探針標記及檢測系列產品
5、核酸擴增系列產品
6、克隆表達系列產品
7、基因組研究系列產品
8、蛋白質研究系列產品
9、細胞生物學研究系列產品
10、即用型溶液、質粒庫、菌種庫等等
實驗步驟:
(1)可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應注意哪些問題?
答:可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書當DNA 段長度較長(5   kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現象。此時建議按以下方法解決問題:
    1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
    2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
注意事項:
● 可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
反油酸(標準品) Elaidic acid 112-79-8 質量規格:分析標準品,≥99.0% (GC)

反式玉米素葡萄糖苷 trans-Zeatin glucoside 51255-96-0 質量規格:美國進口

反式玉米素 trans-Zeatin 1637-39-4 質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養

反式伊曲康唑 trans Itraconazole 252964-65-1 質量規格:美國進口

反式-鹽酸玉米素 trans-Zeatin hydrochloride 6025-81-6 質量規格:美國進口

反式-羧基格列美脲 trans-Carboxy Glimepiride 127554-90-9 質量規格:美國進口

反式肉桂醛(>95%,BR) trans-Cinnamaldehyde 14371-10-9 質量規格:>95%,BR

反式拉坦前列素 trans Latanoprost 913258-34-1 質量規格:美國進口

反式茴香腦(標準品) cis-Anethol 104-46-1 質量規格:HPLC≥98%,標準品

反式烯醛(standard for GC) (E)-2-Butenal 123-73-9 質量規格:standard for GC

反式白藜蘆醇-4'-酸鹽 trans Resveratrol-4'-sulfate 858187-19-6 質量規格:美國進口

反式白藜蘆醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide 387372-20-5 質量規格:美國進口

反式白藜蘆醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide 387372-17-0 質量規格:美國進口

反式白藜蘆醇-3,5-酸鹽 trans Resveratrol-3,5-disulfate 858187-21-0 質量規格:美國進口

反式-9-十八烯酸酯(標準品) trans-9-Octadecenoic methyl ester 2462-84-2 質量規格:分析標準品

反式(2,3)-二那嗪 trans (2,3)-Dihydro Tetrabenazine 3466-75-9 質量規格:美國進口

反-肉桂酸膽固醇酯(>96.0%(HPLC)(T)) Cholesterol trans-Cinnamate 50305-81-2 質量規格:>96.0%(HPLC)(T)

反鉑 transplatin  14913-33-8 質量規格:>95%

反環鹽酸鹽;單氧化酶(MAO)抑制劑 Tranylcypromine (2-PCPA) HCl 1986-47-6 質量規格:>97%,單氧化酶(MAO)抑制劑
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書CefotaximeSodium規格:效價測定

Cefoperazonesodium規格:870μg-1015μg/mg,USP,BR

Cefoperazonesodium規格:效價測定

CefoperazoneAcid規格:>98%,BR

CefoperazoneAcid規格:含量測定

Cefodizimesodium規格:>90%,BR

Cefodizimeacid規格:>90%,BR

Cefmenoximehydrochloride規格:Cefmenoxime≥93%,BR

Cefixime規格:>98%,BR

Cefixime規格:>98%,標準品

 

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