免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產品僅用于科研保存前需經除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性：
(1)結合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區別，就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
LB瓊脂人肺間充質干細胞腎動脈內皮細胞ABCA1(ATP binding cassette transporter A1)  腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗原

玉米粉瓊脂培養基人脊柱間充質干細胞腎動脈平滑肌細胞TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑

高氏一號合成培養基人微血管內皮細胞腎小管上皮細胞GLUT12  葡萄糖轉運蛋白12

L型細菌高滲糖增菌培養基人上皮細胞腎小球內皮細胞EGFRvIII  表皮生長因子受體III型突變體抗原

L型細菌高滲鹽增菌培養基人成纖維細胞子宮內膜上皮細胞CD26  CD26抗原

疊氮鈉葡萄糖肉湯人臍靜脈內皮細胞卵巢顆粒細胞ABCG1 peptide  三磷酸腺苷結合盒亞家族G1抗原

乙基紫疊氮鈉肉湯人臍動脈內皮細胞淋巴管內皮細胞Cardiac Troponin T  心肌特異性肌鈣蛋白T

孟加拉紅（虎紅）培養基人臍靜脈平滑肌細胞淋巴成纖維細胞BACE( ASP2 )   β分泌酶（抗原）

Fibulin 1/FITC  熒光素標記抗“衰老關鍵蛋白”IgG卷曲螺旋結構域蛋白1522-溴-4-(三氟甲基)苯甲酸Rat MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ(Major  Histocompatibility ComplexⅡ) 檢測試劑盒

Phospho-FHIT (Tyr114) /FITC  熒光素標記抗磷酸化脆性組氨酸三聯體IgG甘油二酯膽堿磷酸轉移酶2,5-雙(三氟甲基)苯胺Rat MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ(Major  Histocompatibility ComplexⅢ) 檢測試劑盒

Fibulin-5/FITC  熒光素標記抗“衰老關鍵蛋白”IgG嗜鉻粒素B2,5-雙(三氟甲基)苯胺Rat RETN (Resistin) 檢測試劑盒

FLG/FITC  熒光素標記絲聚蛋白/中間絲蛋白IgG血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白12,5-雙(三氟甲基)苯胺Rat CA15-3 (Carbohydrate Antigen 15-3) 檢測試劑盒

FLIP S/L /FITC  熒光素標記凋亡調節基因之一IgG細胞色素P450Ⅱj3谷氨酸利塞膦酸鹽半五水合物Rat MAT (Matrilysin) 檢測試劑盒

FLIPS/FITC  熒光素標記凋亡調節基因之一（短型）IgG鈣激活氯離子通道4三羥甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-1 (Matrix Metalloproteinase 1) 檢測試劑盒

FN /FITC  熒光素標記纖維連結蛋白IgG周期素依賴性激酶6三羥甲基烷*基烯酸酯Rat MMP-2 (Matrix Metalloproteinase 2) 檢測試劑盒

FN/RBITC  紅色熒光素標記纖維連接蛋白IgG周期素依賴性激酶73，4，5-TrimethoxybenzhydrazideRat MMP-3 (Matrix Metalloproteinase 3) 檢測試劑盒
過氧化物酶體肉堿酰基轉移酶抗體柑橘藻斑病*Mouse FLT1/VEGFR1 (Vascular Endothial Growth Factor Receptor 1)  Kit 小鼠腎癌細胞

紡錘形賴氨酸芽孢桿Mouse VEGFR-2/KDR (Vascuoar Endothial Growth Factor Receptor 2)  Kit 人類冠狀動脈內皮細胞

空泡極單胞Mouse HO-1 (Heme Oxygenase 1)  Kit人正常結腸上皮細胞

地衣芽孢桿Mouse HO-2 (Heme Oxygenase 2, Decycling)  Kit  小鼠視網膜神經節細胞株

食蔗糖葡糖酸醋桿Mouse RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B)  Kit人正常胰腺導管上皮細胞

釀酒酵母Mouse HJV (Hemojuvin)  Kit  人微血管內皮細胞

炭疽沉淀素血清Mouse HPA (Heparanase)  Kit 人多形性惡性膠質瘤細

膠胞（可訂購）Mouse ALB (Albumin)  Kit肝枯否細胞