客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：鈣熒光探針Fluo-3, AM  

規(guī)格：100 μg/1 mg/10×100 μg

貨號(hào)：BJP1186

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

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檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

制霉菌素實(shí)驗(yàn)步驟SimpleChIP® Human γ-Actin Intron 3 Primers100 ul

鹽酸萬古霉素實(shí)驗(yàn)步驟mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

克拉霉素價(jià)格STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred)100 ul

溶葡球菌酶實(shí)驗(yàn)步驟Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

纖維素酶R-10價(jià)格PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

20mg/ml蛋白酶K溶液使用說明書Drebrin (pan) Antibody100 ul

5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷保存Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb20 ul

多酚氧化酶（菌菇）價(jià)格Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb100 ul

肌酐酶使用說明書Argonaute 3 (D15D2) Rabbit mAb100 ul

抑肽酶（牛肺）保存LRF/Pokemon (D7U2O) Rabbit mAb100 ul

碳酸酐酶（牛紅血球）價(jià)格Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

3',6'-二氯熒光素使用說明書β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-（二乙氨基）酚使用說明書NPC1L1 Antibody100 ul

N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基本鈉鹽保存Granzyme B (D2H2F) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

2-氨基吖啶酮實(shí)驗(yàn)步驟α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)100 ul

DL-異檸檬酸三鈉鹽使用說明書RKIP (G38) Antibody100 ul

酵母聚糖A實(shí)驗(yàn)步驟HO-1 (P249) Antibody100 ul
鈣熒光探針Fluo-3, AM  腸炎沙門氏菌種屬: Salmonella enteritidis西林瓶，定性菌片安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；教學(xué)；分類。培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。生長(zhǎng)條件: 37℃，好氧。生長(zhǎng)特性: 革蘭氏陰性桿菌，大小為0.6-2.0μm × 1.0-4.0μm，通常以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)；兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高；不能利用檸檬酸鹽作為碳源；產(chǎn)氣，大多數(shù)菌株不產(chǎn)生H2S，發(fā)酵阿拉伯糖而不發(fā)酵木糖，僅對(duì)人致病，能夠引起與傷寒類似的癥狀。存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存；運(yùn)輸條件：冰袋運(yùn)輸。

Alternaria│tenuissima斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃

Trichoderma│sp.分離基物: 植物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 18-26℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Erythrobacter│citreus分離基物: 沉積物/土黃色沉積物上覆水凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1、海洋石油污染生物修復(fù)； 2、生物活性物質(zhì)篩選。培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Vibrio│sp.分離基物: 生物樣/赤點(diǎn)石斑魚腸體內(nèi)容物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 共生微生物/赤點(diǎn)石斑魚腸道共生菌培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Asaia│sp.分離基物: 野生諾尼果內(nèi)凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Chromohalobacter│sp.分離基物: 水樣/表層海水斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/高鹽菌（鹽度20%-26%）培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 20-25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson分離基物: 枝斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長(zhǎng)條件: 30存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Nocardioides│terrigena分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 832生長(zhǎng)條件: 18℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。