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免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | BRD3蛋白抗體 |
英文名稱 | BRD3 |
貨號 | BJ-K7622 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CAPNS1 antibody28 kDaP04632Human, Mouse, Rat資源名稱高盧蜜環(huán)菌分離基物:蒙古櫟提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CAPRIN1 antibody116kdQ14444Human, Mouse, Rat資源名稱多年擬層孔分離基物:倒木提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CAPRIN2 antibody130 kDa Q6IMN6Human, Mouse, Rat資源名稱松生擬層孔菌分離基物:枯樁提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no
CAPS1 antibody150 kDa Q9ULU8Human, Mouse, Rat資源名稱扁芝分離基物:倒木提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CAPSL antibody24 kDa Q8WWF8Human, Mouse, Rat資源名稱松杉靈芝分離基物:針葉樹樁提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CAPZA1 antibody33kdP52907Human, Mouse, Rat資源名稱元蘑分離基物:倒木提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
CAPZA1 antibody33kdP52907Human, Mouse 資源名稱粗毛纖孔菌分離基物:活立木提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
鄂木斯克出血熱病毒PCR檢測試劑盒 Omsk Hemorrhagic Fever Virus(OHFV)RTPCR規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌計數(shù)(GB標準)
馬蘇哈魚病毒PCR檢測試劑盒 Oncorhynchus Masou Virus(OMV)PCR規(guī)格:50個/包*4用途:用于樣品的取樣采集。
阿尼昂尼昂病毒PCR檢測試劑盒 O'nyongnyong Virus(ONNV)RTPCR規(guī)格:250g用途:用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用(GB標準)
羊口瘡病毒PCR檢測試劑盒 Orf Virus(ORFV)PCR規(guī)格:0.5ml*10用途:用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(GB、SN標準)。
恙蟲病東方體PCR檢測試劑盒 Orientia tsutsugamushiPCR規(guī)格:9ml*20支/包用途:用于李氏菌二步增菌
BRD3蛋白抗體乳白耙菌Human GAL8 (Galectin 8) Kit 發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞;G1
大腸埃希菌Human GAL7 (Galectin 7) Kit 小鼠胚胎干細胞;LT04
東方伊薩酵母Human GAL9 (Galectin 9 ) Kit 小鼠雜交瘤細胞;9D47A1
貝酵母Human Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) Kit小鼠雜交瘤細胞;TE11A1
黑曲霉Human UBC (Urinary Bladder Cancer Antigen) Kit小鼠雜交瘤細胞;SCGN-F9
香菇Human PLA2R1 (Phospholipase A2 Receptor 1) Kit小鼠雜交瘤細胞;Reg_G7
明尼蘇達被毛孢Human PLB (Phospholipase B) Kit小鼠雜交瘤細胞;hnRNP B1 A10
武夷小單孢菌Human cPLA2 (Cytosolic Phospholipase A2) Kit雜交瘤細胞;6A2
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