免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
TIF1 beta/KAP1  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β磷酸化活化復(fù)制因子25-氨基-1-戊Mouse CNP (C-type natriuretic peptide) 檢測試劑盒

Phospho-TIF1beta (Ser824)  磷酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β磷酸化活化復(fù)制因子2乙烯基吡咯烷酮-乙烯酯共聚Mouse CTACK (Cutaneous T-Cell Attracting Chemokine) 檢測試劑盒  

TIF1 gamma/Trim33  轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ磷酸化活化復(fù)制因子2乙烯基吡咯烷酮-乙烯酯共聚Mouse β-CTx (Beta Crosslaps) 檢測試劑盒

Tissue factor  組織因子磷酸化活化復(fù)制因子23-乙炔基吡啶Mouse CXCR3 (CXC-chemokine receptor 3) 檢測試劑盒

TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑活化轉(zhuǎn)錄因子5叔十二硫Mouse COL2 (Collagen Type Ⅱ) 檢測試劑盒

TFPI-2  組織因子途徑抑制劑-2活化轉(zhuǎn)錄因子6β叔十二硫Mouse CREB (Cyclic AMP Response Eleme Binding Protein) 檢測試劑盒  

TGF-alpha  轉(zhuǎn)移生長因子–αAICAR甲酰基轉(zhuǎn)移酶3,5-二甲基異惡唑-4-羧酸Mouse c-myc (c-myc Oncogene Product) 檢測試劑盒

TGF- Beta 1  轉(zhuǎn)化生長因子β1磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白3,5-二甲基異惡唑-4-羧酸Mouse CDK5 (Cyclin Depende Kinase 5) 檢測試劑盒  

GTP酶IMAP家族成員2Monkey PA-IgM (Plaet Associated Aibody) 檢測試劑盒

GTP酶IMAP家族成員3Monkey ELA3B (Elastase 3B) 檢測試劑盒

GTP酶IMAP家族成員4Monkey TA (Ai-Teichoic Acid Aibody) 檢測試劑盒

GTP酶IMAP家族成員5Monkey GADL1 (Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) 檢測試劑盒

G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2Monkey Apo A1-Ab (Ai-Apolipoprotein A1 aibody) 檢測試劑盒

GTP酶IMAP家族成員7Monkey GSTpi (Glutathione S Transferases Pi) 檢測試劑盒

GTP酶IMAP家族成員8Monkey PS (Phosphatidylserine) 檢測試劑盒

G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1Monkey CA19-9 (Carbohydrate aigen19-9) 檢測試劑盒
軸蛋白1抗體Sporobolomyces│roseus分離基物: Bambusa sp.植物葉片提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 17℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Alphaherpesvirinae│Duck plague virus分離基物: 病雞結(jié)痂提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37真空冷凍干燥法;

羊布氏種屬: Brucella│melitensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式株: no生產(chǎn)獸用死苗,強(qiáng)株培養(yǎng)基: CM0112生長條件: 37℃-80℃冰箱凍結(jié)法

卷枝毛霉lusitanicus變型種屬: Mucor│circinelloides f. lusitanicus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: yesType strain of M. jauchae培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Mycobacterium│paratuberculosis分離基物: 副結(jié)核病牛腸提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no科研及血清定型培養(yǎng)基: 182生長條件: 37真空冷凍干燥法;

Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃礦物油法

Bacillus│vallismortis分離基物: 哈密瓜汁提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no抑制棉花枯萎病、抑制梨綠霉病原、抑制梨黑霉病原、抑制炭疽霉病原培養(yǎng)基: CM0003生長條件: 35-37℃真空冷凍干燥法

Streptomyces│echinatus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0039生長條件: 28C真空冷凍干燥

Zobellella│denitrificans分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物模式株: no潛在的反硝化/以硝酸根為電子受體分離，可用于生物脫氮研究;產(chǎn)酶微生物/淀粉酶培養(yǎng)基: 472生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法