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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
水通道蛋白-9抗體 | AQP9 | BJ-K6727 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養雜交瘤細胞:體外培養雜交瘤細胞,從培養液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
HVEM/FRSF14 腫瘤壞死因子受體超家族成員14磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3(3-氯基)*氧基硅烷Mouse ERN1 (Endoplasmic Reticulum To Nucleus Signalling 1) 檢測試劑盒
FRSF13B 腫瘤壞死因子受體超家族成員13B磷酸化蛋白激酶B(3-氯基)*氧基硅烷Mouse ES (Endostatin) 檢測試劑盒
K1 非受體型酪氨酸蛋白激酶k1磷酸化活化復制因子2(3-氯基)*氧基硅烷Mouse EL (Endothelial lipase) 檢測試劑盒
Phospho-K1 (Tyr277) 磷酸化非受體型酪氨酸蛋白激酶k1凋亡相關蛋白3芐基三丁基溴化銨Mouse NOS3/eNOS (Nitric Oxide Syhase 3, Endothelial) 檢測試劑盒
mt 線粒體DNA拓普西異構酶Ⅰ自噬相關蛋白18芐基三丁基溴化銨Mouse ET-1 (Endothelin 1) 檢測試劑盒
TOP2 alpha DNA拓普西異構酶ⅡA自噬相關蛋白4A芐基三丁基溴化銨Mouse ECE1 (Endothelin Converting Enzyme 1) 檢測試劑盒
TOPO II Alpha DNA拓普西異構酶Ⅱ載脂蛋白A46-(1H-吡唑-1-基)煙酸Mouse ETRA (Endothelin Receptor A) 檢測試劑盒
TOPO II Alpha (Ser1106) 磷酸化DNA拓普西異構酶Ⅱ12脂氧合酶蔗糖十二烷酸酯Mouse ELMO2 (Engulfme And Cell Motility 2) 檢測試劑盒
G蛋白偶聯受體77Monkey Ai-AlaRS (Ai-Alanyl-tRNA Syhetase/Ai-PL12-Aibody) 檢測試劑盒
精神發育遲滯相關蛋白Rab GDI αMonkey FABP3 (Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle and Heart) 檢測試劑盒
甘油磷酸二酯酶磷酸結構域4Monkey AMPK (Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) 檢測試劑盒
D-果糖6磷酸轉移酶2Monkey F9 (Coagulation Factor Ⅸ) 檢測試劑盒
GA結合蛋白轉錄因子α/GABP-αMonkey ENG/CD105 (Endoglin) 檢測試劑盒
GA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2Monkey -I (Troponin I) 檢測試劑盒
谷氨酸脫羧酶65+谷氨酸脫羧酶67Monkey PPARγC1α (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha) 檢測試劑盒
谷氨酸脫羧酶樣蛋白1Monkey APC (Activated Protein C) 檢測試劑盒
水通道蛋白-9抗體Acetobacter│aceti提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no山梨醇發酵培養基: 0001生長條件: 30℃液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no產檸檬酸。培養基: CM0013生長條件: 35℃礦物油法
Agrobacterium│tumefaciens提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no用于植物轉化等科學研究培養基: 0032生長條件: 28℃-80℃冰箱凍結法
Alternaria│catalpae (Ellis & Mo.) P. Joly分離基物: 梓樹 葉部提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no培養基: 14生長條件: 25定期移植法
Microbacterium│sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no潛在的有機污染物降解/分離自石油富集群培養基: 821生長條件: 28℃液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Torula│herbarum (Pers.) Link分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no培養基: 14生長條件: 25定期移植法
泛養副球種屬: Paracoccus paotrophus分離基物: 廢物處理廠荷蘭提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式株: yes模式株培養基: 128生長條件: 30℃
Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養基: 110生長條件: 37℃真空冷凍干燥法
Trichosporon│cutaneum分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養基: 14生長條件: 28℃真空冷凍干燥法
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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