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口蹄疫病毒(A4亞型)保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-22 20:27:35瀏覽次數:196次

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口蹄疫病毒(A4亞型)保存低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規格參數:
資源名稱  口蹄疫病毒(A4亞型)保存
種屬: Aphthovirus│Foot and mouth disease virus

分離基物: 病料

提供形式: 凍干物

安全等級: 4

模式菌株: no

應用領域: 檢驗

培養基: 0

生長條件: 37

存儲條件: 真空冷凍干燥法;

?
儀器設備與器具:
1 恒溫培養箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養方法:
培養基 乳酸菌培養基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養基充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。
鏈球菌(不定種)安全等級2提供形式凍干物種屬Streptococcus│sp.

傳染性支氣管炎病毒安全等級2提供形式凍干物種屬Coronavirus│Infectious bronchitis virus

禽腦脊髓炎病毒安全等級2提供形式凍干物種屬Enterovirus│Avian encephalomyetitis virus

大腸埃希菌安全等級2提供形式凍干物種屬Escherichia│coli

牛瘟病毒安全等級2提供形式凍干物種屬Morbillivirus│Rinderpest virus

兔出血癥病毒安全等級3提供形式凍干物種屬Lagovirus│Rabbit hemorrhagic disease virus

單核細胞增生李斯特菌安全等級2提供形式凍干物種屬Listeria│mocytogenes

DH5α大腸桿菌克隆菌株應用領域基本應用:用于基因克隆 基因型: F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA模式菌株未知種屬DH5α Strain

小鼠骨橋蛋白elisa檢測試劑盒

英文名稱:Mouse Osteopontin ELISA KIT

反應性:Mouse

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:8 pg/ml

檢測目標:Osteopontin/OPN

應用:Sandwich ELISA
妥布英文名稱:Tobramycin保存:20℃,避光規格:200mg小鼠增殖細胞核抗原單克隆一抗

卷曲英文名稱:Capreomycin保存:20℃,避光規格:200mg化視網膜母細胞瘤樣蛋白p107一抗

去萬古英文名稱:rvancomycin保存:20℃,避光規格:150mg視網膜母細胞瘤相關蛋白p130一抗

麥迪英文名稱:Maddie mycin保存:20℃,避光規格:200mg蛋白酶2Cα一抗

南板藍根英文名稱:Rhizoma et Radix Baphicacanthis Cusiae保存:20℃,避光規格:5gB淋巴細胞誘導成熟蛋白1一抗

乳香英文名稱:Frankincense保存:20℃,避光規格:0.5g成對螺旋細絲蛋白一抗

陳皮英文名稱:Dried tangerine peel保存:20℃,避光規格:1g植烷氧化酶一抗

靈芝英文名稱:Gaderma lucidum保存:20℃,避光規格:2g蛋白二鍵異構酶P4HB一抗

沒藥(天然沒藥)英文名稱:Myrrh (NATURAL myrrh)保存:20℃,避光規格:1g蛋白激酶C一抗

仙鶴草英文名稱:Agrimonia pilosa保存:20℃,避光規格:1g蛋白酶體復合物C5一抗

木芙蓉葉英文名稱:Hibiscus leaves保存:20℃,避光規格:1g重組豬腦結構蛋白一抗

千里光英文名稱:Climbing Groundsel Herb保存:20℃,避光規格:10g脂酶A2激活蛋白一抗

干蟾皮英文名稱:Dried toad skin保存:20℃,避光規格:0.5g胸苷化酶一抗

湖北貝母英文名稱:Hubei Fritillaria保存:20℃,避光規格:5g早老素蛋白2一抗

狼毒(月腺大戟)英文名稱:Slera chamaejasme (Euphorbia ebracteolata Hayata)保存:20℃,避光規格:4.0gpiwi樣2蛋白一抗

相思子英文名稱:Abrin保存:20℃,避光規格:5g豬瘟一抗

瓦松英文名稱:Wa Song保存:20℃,避光規格:1g脂滴包被蛋白PerilipinA一抗
口蹄疫病毒(A4亞型)保存乙醇胺激酶β抗體Glabralide B中文名:別名:分子式:C21H26O3

卷曲螺旋結構域蛋白5抗體Glabralide C中文名:別名:分子式:C29H40O4

有絲分裂著絲粒蛋白F抗體Muricarpone B中文名:別名:分子式:C19H22O5

細胞周期通道和神經細胞分化蛋白1抗體Eulophiol中文名:別名:9,10-Dihydro-2,7-dimethoxyphenanthrene-1,5-diol分子式:C16H16O4

凝集蛋白家族10抗體(肝)3-(3-Hydroxybutyl)phel中文名:別名:分子式:C10H14O2
微生物培養方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養過程復雜,對平板的要求比較高,產品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養基將蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿,輕輕搖動培養皿,使培養基溶液均勻分布在培養皿底部,待培養基溶液凝固后即得平板培養基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。

 

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