客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱(chēng)：脂性Cy3-N-羥基琥珀酰亞胺酯

規(guī)格：1 mg/5 mg

貨號(hào)：BJP1146

分類(lèi)：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

染料法

探針?lè)ā?/span>

可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn) 

·溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)

·完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針?lè)ǎ?/span>

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針?lè)ň哂懈叩奶禺愋院蜏?zhǔn)確性。

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檢測(cè)步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照)，每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

NCI-H358（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞）報(bào)價(jià)ARK5 Antibody100 ul

SK-N-BE（2） （人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞）說(shuō)明書(shū)Phospho-RIP (Ser166) (D8I3A) Rabbit mAb100 ul

人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)C (D5M1K) Rabbit mAb100 ul

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基報(bào)價(jià)Ran Antibody100 ul

大鼠甲狀腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Hop Antibody100 ul

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb20 ul

IMDM現(xiàn)貨供應(yīng)Keratin 7 (D1E4) XP® Rabbit mAb100µl

巴利森苷E 952068-57-4*XCR1 (D2F8T) Rabbit mAb100 ul

3'甲氧基葛根素117047-07-1*β3-Tubulin (TU-20) Mouse mAb100 ul

蒼術(shù)苷A126054-77-1價(jià)格Bif-1 Antibody60ml

短葶山麥冬皂苷C87480-46-4 價(jià)格200 mM HEPES1 Kit

反式茴香腦 104-46-1 實(shí)驗(yàn)方法Human T Cell Co-inhibitory and Co-stimulatory Receptor IHC Antibody Sampler Kit100 ul

加蘭他敏357-70-0 實(shí)驗(yàn)步驟RagD Antibody20 ul

甲基麥冬黃烷酮B 74805-91-7 *RagD Antibody100 ul

金石蠶苷94079-81-9實(shí)驗(yàn)方法SMARCAL1 (D3P5I) Rabbit mAb500 ul

金松雙黃酮521-34-6價(jià)格SimpleChIP® Human GAPDH Promoter Primers100 ul

升麻素苷80681-45-4實(shí)驗(yàn)步驟PKCα (D7E6E) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
脂性Cy3-N-羥基琥珀酰亞胺酯Lactobacillus│pentosus分離基物: 酸奶凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵酸奶培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk分離基物: 銀杏葉片斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 植物病原物；用于該類(lèi)群菌的系統(tǒng)學(xué)研究培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Streptomyces│sp.分離基物: 植物根際斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28-30存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Bacillus│sphaericus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0003生長(zhǎng)條件: 35-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: BL21（DE3）/ pET26b- N63P培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Marinobacter│hydrocarbonoclasticus分離基物: 沉積物/深海沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐壓菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Bradyrhizobium│japonicum分離基物: 大豆根瘤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 導(dǎo)入外源nfeC基因?qū)Ω鼍?jìng)爭(zhēng)結(jié)瘤能力的影響培養(yǎng)基: 63生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│thuringiensis凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 348生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk分離基物: 圓柏樹(shù)皮斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱(chēng)、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線(xiàn)；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線(xiàn)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。