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楊鏈格孢保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-26 14:02:21瀏覽次數:168次

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楊鏈格孢保存低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規格參數:
資源名稱  楊鏈格孢保存
種屬: Alternaria│populi

分離基物: 植物

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養基: 0014

生長條件: 18-26℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

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儀器設備與器具:
1 恒溫培養箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養方法:
培養基 乳酸菌培養基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養基充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。
Apo-H ELISA Kit   大鼠載脂蛋白H   常溫,避光  規格:100mg

TRAIL-R1(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit  人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1   常溫,避光  規格:50mg

TNF- Beta(Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子β   常溫,避光  規格:50mg

HBsAg(Mouse hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit  小鼠乙型肝炎表面抗原   2℃,避光  規格:500mg

ILR ELISA Kit   大鼠白介素2受體   常溫,避光  規格:50mg

ENG/sCD105(Soluble Endoglin) ELISA Kit  人可溶性Endoglin   常溫,避光  規格:50mg

TNF- Alpha(Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子α   常溫,避光  規格:50mg

ADM ELISA Kit   大鼠腎上腺髓質素   常溫,避光  規格:100mg

Beta-EPR ELISA Kit  大鼠β內啡肽受體   常溫,避光  規格:50mg

APC(Mouse activated protein C) ELISA Kit  小鼠活蛋白C   常溫,避光  規格:50mg

TNFsR- II (Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ   常溫,避光  規格:50mg

CAMK 2 ELISA Kit  大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2   常溫,避光  規格:200mg

a-Glu(Mouse Alpha-Glucosidase) ELISA Kit  小鼠α葡萄糖苷酶   常溫,避光  規格:100mg

TNFsR- I (Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA KIT  人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ   常溫,避光  規格:100mg

TGF- Beta1(Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit  人轉生長因子β1   常溫,避光  規格:100mg
沙宗相關物質A標準品  規格:50mg  英文名稱:

鹽標準品  規格:25mg  英文名稱:

鹽美普卡標準品  規格:200mg  英文名稱:Meprylcaine Hydrochloride

福辛普利相關物質A標準品  規格:25mg  英文名稱:

奧美拉鎂標準品  規格:10mg  英文名稱:Omeprazole Magnesium

沙宗標準品  規格:350mg  英文名稱:Chlorzoxazone

阿托伐醌標準品  規格:200mg  英文名稱:Atovaquone

昔美沙美特羅標準品  規格:150mg  英文名稱:Salmeterol Xinafoate

水楊梅提取物標準品  規格:150mg  英文名稱:Pygeum Extract

羥丁酯標準品  規格:200mg  英文名稱:Butylparaben

(基氨基)鋇鹽  *  英文名稱:Bariumdiphenylaminesulfonate  含量:BR

1(2’甲酰)3,3,3三  *  英文名稱:TTA  含量:BR

1(3二甲氨基基)3乙基碳二亞  *  英文名稱:WSC  含量:高純,50%

1(4丁氧基)3(1基)1鹽鹽  *  英文名稱:Dycloninehydrochloride  含量:BR,豬心,95%

1,1,1,3,3,3六2  *  英文名稱:HFIP  含量:CP

1,1,1三2,4二  *  英文名稱:TAA  含量:AR,97%

1,1,1*氧基乙  *  英文名稱:Trimethylorthoacetate  含量:4N

1,1,1三乙氧基  *  英文名稱:Triethylorthopropionate  含量:GR,99.5%

1,1,2三1,2,2三乙  *  英文名稱:1,1,2Trichlorotrifluoroethane  含量:CP,99.5%

1,1’,1’’次甲基三  *  英文名稱:Triphenylmethane  含量:AR,99%
楊鏈格孢保存Guanidine sulfate,99%通用試劑 100G

3-Ami-5-cyclopropyl-1H-pyrazole,99%通用試劑 250MG

2-Nitroimidazole,98%通用試劑 1G

2-Nitroimidazole,98%通用試劑 250MG

2,1,3-Benzothiadiazole,98%通用試劑 5G

3,6-Dibromo-9-phenylcarbazole,98%通用試劑 1G

4-Bromo-1H-imidazole,97%通用試劑 1G

5-Bromothiazole,95%通用試劑 1G

2-Bromothiazole-5-carboxylic acid,97%通用試劑 1G

Ethyl 2-amithiazole-4-carboxylate,96%通用試劑 1G

4-Thiazolecarboxylic acid,97%通用試劑 1G

2-Ami-4-methylbenzothiazole,97%通用試劑 5G

2,6-Dichlorobenzothiazole,≥97%通用試劑 1G

4,5-Dimethylthiazole,≥97%通用試劑 5G

4-Bromopyrazole,99%通用試劑 1G
微生物培養方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養過程復雜,對平板的要求比較高,產品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養基將蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿,輕輕搖動培養皿,使培養基溶液均勻分布在培養皿底部,待培養基溶液凝固后即得平板培養基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。

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