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毛殼菌說(shuō)明書(shū)

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更新時(shí)間:2020-11-30 13:12:16瀏覽次數(shù):262次

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毛殼菌說(shuō)明書(shū)低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱(chēng)  毛殼菌說(shuō)明書(shū)
種屬: Chaetomium│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 未知

培養(yǎng)基: 14

生長(zhǎng)條件: 25-28℃

存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類(lèi),通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類(lèi)單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
Chrysomya bezziana倍贊氏金蠅LAMP試劑盒英文名稱(chēng):Collagenase II

產(chǎn)品規(guī)格:100mg

發(fā)貨周期:1~3天

本品為II型膠原酶,≥125 U/mg solid,可用于心、甲狀腺、唾液腺、肝、骨、軟骨等組織和細(xì)胞的解離。本品來(lái)源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準(zhǔn)確的稱(chēng)法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質(zhì),使得本品非常適用于組織消化。

膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。

目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類(lèi)型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應(yīng)用上有所偏向:

1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備;

2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來(lái)源細(xì)胞的制備;

3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于細(xì)胞的制備;

4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。

酶活力單位定義

在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。

儲(chǔ)存條件:4℃,有效期兩年
纈沙坦標(biāo)準(zhǔn)品Human glial fibrillary acidic protein ELISA Kit純度:0.988

戊柔比星分離度用混合物標(biāo)準(zhǔn)品Human Epithelial cell-derived neutrophil-activating protein-78 ELISA Kit純度:0.997

戊柔比星標(biāo)準(zhǔn)品Human CPAF ELISA KIT純度:0.997

戊標(biāo)準(zhǔn)品Human T3 ELISA Kit純度:0.993

纈更昔韋鹽鹽標(biāo)準(zhǔn)品Human β-HCG ELISA Kit純度:0.989

纈草標(biāo)準(zhǔn)品Human HCG ELISA Kit純度:0.98

鹽萬(wàn)乃韋標(biāo)準(zhǔn)品Human pregnancy associated plasma protein-A ELISA Kit純度:0.999

Rat Endostatin,ES ELISA Kit大鼠內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T110874-200203鑒別纈氨酸規(guī)格:100mg

Rat brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit大鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T110875-200506鑒別瓜氨酸規(guī)格:20mg

Rat Prostaglandin E2,PG-E2 ELISA Kit大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T110876-200204鑒別亮氨酸規(guī)格:100mg

Rat Neuron-specific elase,NSE ELISA Kit大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T110877-200001含量測(cè)定兒茶素規(guī)格:20mg

Rat intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T110878-200102含量測(cè)定表兒茶素規(guī)格:20mg

Rat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T110879-200202含量測(cè)定腺苷規(guī)格:20mg
毛殼菌說(shuō)明書(shū)組織唾液酸(SA)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次*

組織糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織糖原磷酸化酶b(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒10次*

組織糖原磷酸化酶a(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒10次*

組織糖原磷酸化酶(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒10次*

組織糖原化學(xué)水解比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織糖原合成酶(GLYCOGEN synthase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織糖類(lèi)總量鐵比色法定量elisa試劑盒    20次    *
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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