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免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | BarX1蛋白抗體 |
英文名稱 | BarX1 |
貨號 | BJ-K7429 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。?
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
ARC/ARG3.1 antibody45-50 kDa Q7LC44Human, Mouse, Rat資源名稱梭菌屬分離基物:窖泥提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
ARCN1 antibody57 kDa ; 47 kDa P48444Human, Mouse 資源名稱固氮菌屬提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
ARD1A antibody26 kDa Q6P4J0Human, Mouse, Rat資源名稱克氏梭菌分離基物:酒糟提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1
ARD1B antibody26kdQ9BSU3Human, Mouse, Rat資源名稱簇孢匍柄霉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
ARF1 antibody21 kDa P84077Human, Mouse, Rat, Monkey資源名稱短柄帚霉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no
ARF1 antibody21 kDa P84077Human, Mouse 資源名稱羅倫氏隱球酵母提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no
ARF3 antibody18-20 kDa P61204Human, Mouse, Rat資源名稱惡臭醋桿菌提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no
大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒含致病性和非致病性 E.coliPCR()規(guī)格:用途:用于溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)(GB4789.11-2014)
東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒 Eastern Equine Encephalomyitis Virus(EEEV )RTPCR規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌等的分離培養(yǎng)
埃博拉病毒PCR檢測試劑盒 Ebola Virus(EBOV)RTPCR規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動力和硝鹽還原試驗
細粒棘球絳蟲PCR檢測試劑盒 Echinococcus granulosusPCR規(guī)格:250g用途:用于性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗
棘球絳蟲通用PCR檢測試劑盒 Echinococcus spp.PCR規(guī)格:250g用途:用于真菌的培養(yǎng)
BarX1蛋白抗體泡盛曲霉Human AAP (Alanine Aminopeptidase) Kit人食管癌細胞;TE-11
葡萄園有孢漢遜酵母Human FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) Kit人肺扁平上皮癌細胞;QG-56 [QG56]
藍微褐鏈霉菌Human FGF21 (Fibroblast Growth Factor 21) Kit人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞;HCCLM3
硬結(jié)節(jié)桿菌Human Flt3L (FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) Kit 人T淋巴細胞白血病細胞;A3
澤普林假絲酵母Human FST (Follistatin) Kit人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]
施氏假單胞菌Human Hepc (Hepcidin) Kit 人前列腺癌細胞;22Rv1
溶桿菌Human Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) Kit人結(jié)直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]
貝萊斯芽胞桿菌Human G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) Kit 人結(jié)直腸腺癌細胞;COLO 205
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