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莽草酸脫氫酶(SD)測試盒微量法

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-08-19 20:51:01瀏覽次數(shù):137次

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貨號 BJ-01611363-1
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

莽草酸脫氫酶(SD)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611363-1

商品介紹:

測定意義:                          

莽草酸途徑是存在于植物、真菌和微生物中的一條重要的代謝途徑,莽草酸脫氫酶是莽草酸合成途徑中的關(guān)鍵酶。

測定原理:

莽草酸脫氫酶催化莽草酸和NADP產(chǎn)生NADPH,檢測340nm下的吸光值增加速率來表示SD活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

10.png 

測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體解芽孢桿菌苷松新酮

suan化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體腐皮鐮孢梔子

組蛋白去乙?;?/span>1抗體微枝形桿菌紅芪

半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體釀酒酵母桑椹

suan化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)小果豆包菌八角楓

異染色質(zhì)蛋白1磷suan化抗體(果蠅)惡臭假單胞菌狼(狼大戟)

缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體噬果膠黃桿菌飛龍掌血根皮

甲型流感病M2抗體釀酒酵母硝suan

熱休克蛋白-47抗體頂青霉

人類狀瘤病16抗體梨紅菇氫樟柳

缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1α環(huán)狀芽孢桿菌磺酰化物(雜質(zhì)D-5-甲氧基-2-{[(4-甲氧基-2-吡啶基)-甲基]-磺?;鶀-1H-苯

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人類巨病抗體食環(huán)氧化物交替紅色桿菌凋亡蛋白活性因子-1抗體流式免疫組化(N端)IHC WB

人類皰疹病8抗體孟氏假單胞菌角質(zhì)形成生長因子受體抗體流式免疫組化
莽草酸脫氫酶(SD)測試盒微量法血小板相關(guān)球蛋白(PAIg)試劑盒 Anti-P9 Antibody轉(zhuǎn)移生長因子–β3(抗原)

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生長受體(GHR)試劑盒Anti-CBFB Antibody α-1 (-Thymosin alpha-1)

纖維蛋白原β(FGβ)試劑盒Anti-Caspase-2 Antibody半胱suan蛋白mei蛋白-12(多肽)

血紅蛋白β(HBβ)試劑盒 Anti-CBLC Antibody半胱suan蛋白mei蛋白-12抗原(人)

腎上腺髓質(zhì)su(ADM)試劑盒  Anti-CBL Antibody膠質(zhì)系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(多肽)

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒Anti-CBLN1 Antibody人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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