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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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仙芝保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-22 18:58:30瀏覽次數(shù):169次

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仙芝保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。

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規(guī)格參數(shù):
資源名稱  仙芝保存
種屬: Ganoderma│sp.

分離基物: 組織塊

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 藥用菌

培養(yǎng)基: 14

生長條件: 25-30

存儲(chǔ)條件: 定期移植法
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,產(chǎn)品僅用于科研從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
茄病鐮刀菌藍(lán)色變種安全等級(jí)1提供形式凍干物種屬Fusarium│solani var.coeruleum

脅狀擬內(nèi)孢霉模式菌株安全等級(jí)1種屬Endomycopsis│fibuliger

須殼孢屬模式菌株安全等級(jí)1種屬Pyrechaeta│sp.

芽枝孢霉屬安全等級(jí)1提供形式凍結(jié)物種屬Cladosporium│sp.

鼠傷寒沙門氏菌哥本哈根變種模式菌株安全等級(jí)2種屬Salmonella│typhimurium var.copenhagen

腸炎沙門氏菌danysz 變種模式菌株安全等級(jí)2種屬Salmonella│enteritidis var.danysz

綿羊流產(chǎn)沙門氏菌模式菌株安全等級(jí)2種屬Salmonella│abortus-ovis

傷寒沙門氏菌Ty21a,ga模式菌株安全等級(jí)2種屬Salmonella│typhi Gale mntant ty21a

人促泌素elisa檢測(cè)試劑盒

英文名稱:Human SCGN ELISA KIT

反應(yīng)性:Human

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:4 pg/ml

檢測(cè)目標(biāo):SCGN / Secretagogin

應(yīng)用:Sandwich ELISA
睪英文名稱:Testosterone propionate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg基質(zhì)金屬蛋白酶9一抗

芐氟噻嗪英文名稱:Bendroflumethiazide保存:20℃,避光規(guī)格:100mg髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白一抗

甘油三油英文名稱:Three oleic acid ester of glycerol保存:20℃,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關(guān)蛋白1一抗

香荊芥英文名稱:Carvacrol保存:20℃,避光規(guī)格:0.15ml多藥耐藥相關(guān)蛋白2一抗

白果新(銀杏)英文名稱:Ginkgolic acid (Yin Xingsuan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg線粒體核糖體蛋白L28一抗

β,β二酰阿卡寧英文名稱:Beta, beta two methyl acryloyl Akanin保存:20℃,避光規(guī)格:20mg錯(cuò)配修復(fù)蛋白2一抗

天然冰片(右旋)英文名稱:Natural borneol (dextrobomeol)保存:20℃,避光規(guī)格:50mg褪黑素受體1A/松果體素受體1A一抗

牡荊素(牡荊苷)英文名稱:Vitexin (Mu Jinggan)保存:20℃,避光規(guī)格:20mg髓樣分化蛋白一抗

溴檳榔英文名稱:Arecoline hydrobromide保存:20℃,避光規(guī)格:50mg粘蛋白2/上皮膜抗原2一抗

對(duì)二英文名稱:On two chlorobenzene保存:20℃,避光規(guī)格:100mg粘蛋白4一抗

檸檬英文名稱:Citric acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mgMYC結(jié)合蛋白2一抗

啡英文名稱:Caffeic acid ethyl ester保存:20℃,避光規(guī)格:50ml精/脯富含卷曲蛋白1一抗

正十五英文名稱:Are fifteen alkyl保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml微管相關(guān)蛋白9一抗

正十九英文名稱:Are nineteen alkyl保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1一抗

環(huán)英文名稱:Cyclohexane保存:20℃,避光規(guī)格:0.2ml結(jié)核分枝桿菌一抗

辛英文名稱:Octyl acetate保存:20℃,避光規(guī)格:0.5ml肌肉骨骼受體酪激酶一抗

脫卡維英文名稱:Dehydrogenation of Cavitin保存:20℃,避光規(guī)格:20mg膜相關(guān)環(huán)指蛋白1一抗
仙芝保存半胱氨酸雙加氧酶1抗體8-Geranyloxypsoralen中文名:8-香葉氧基補(bǔ)骨脂素別名:分子式:C21H22O4

膠原蛋白11A2抗體Yuehgesin C中文名:別名:分子式:C17H22O5

鈣粘蛋白6抗體Scopolin中文名:東莨菪苷別名:Scopoletin glucoside分子式:

兔抗雞IgY抗體Imperatorin中文名:歐前胡素別名:分子式:C16H14O4

20號(hào)染色體開放閱讀框128抗體Suberosin中文名:軟木花椒素別名:7-Methoxy-6-prenylcoumarin分子式:C15H16O3

 

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