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鐮雄腐霉保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-22 19:02:08瀏覽次數(shù):216次

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鐮雄腐霉保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  鐮雄腐霉保存
種屬: Pythium│falciforme

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0421

生長條件: 25℃

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
Ulocladium botrytis安全等級1提供形式凍結(jié)物種屬Ulocladium│botrytis

變鉛青鏈霉菌模式菌株安全等級1種屬Streptomyces│lividans

大腸埃希氏菌DH5a/pEGFP-CEM15模式菌株安全等級1種屬Escherichia│coli

大腸埃希氏菌DH5α/T/gfp模式菌株安全等級1種屬Escherichia│coli

大腸埃希氏菌DH5α/T/linker-gfp模式菌株安全等級1種屬Escherichia│coli

反卷毛殼安全等級1提供形式斜面培養(yǎng)物種屬Chaetomium│convolutum

放射土壤桿菌模式菌株安全等級1種屬Agrobacterium│radiobacter

分枝桿菌屬菌種安全等級1提供形式凍干物種屬M(fèi)ycobacterium│sp.

人尿激酶型纖溶酶原激活因子受體elisa檢測試劑盒

英文名稱:Human UPAR ELISA KIT

反應(yīng)性:Human

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:15 pg/ml

檢測目標(biāo):UPAR

應(yīng)用:Sandwich ELISA
依替膦二鈉英文名稱:Felodipine impurity I保存:20℃,避光規(guī)格:200mg絲裂原活化蛋白激酶MKK7一抗

非洛地平雜質(zhì)Ⅰ英文名稱:N (4 chlorbenzoyl)  tyramine保存:20℃,避光規(guī)格:50mg甘露聚糖結(jié)合凝集素絲肽酶2一抗

N(4酰) 酪英文名稱:Furacilin保存:20℃,避光規(guī)格:30mg微小染色體維持缺陷蛋白2一抗

喃西林英文名稱:Nitrofurantoin保存:20℃,避光規(guī)格:100mg微小染色體維持缺陷蛋白3一抗

喃妥因英文名稱:Leflumide impurity II保存:20℃,避光規(guī)格:200mg基質(zhì)金屬蛋白酶26一抗

來氟米特雜質(zhì)Ⅱ英文名稱:4 three trifluoromethyl aniline (leflumide impurity I)保存:20℃,避光規(guī)格:50mgMYOZ一抗

4三氟(來氟米特雜質(zhì)I)英文名稱:Warfarin sodium保存:20℃,避光規(guī)格:50mg肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2一抗

華法林鈉英文名稱:Ethyl benzoate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg尿調(diào)節(jié)蛋白一抗

英文名稱:Methylene blue保存:20℃,避光規(guī)格:100mg基質(zhì)金屬蛋白酶20一抗

紅參蘆英文名稱:Red ginseng reed保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g單核細(xì)胞趨化蛋白2一抗

沙棘英文名稱:Sea buckthorn保存:20℃,避光規(guī)格:4g麻疹融合蛋白一抗

白薇英文名稱:Bai Wei保存:20℃,避光規(guī)格:1g肌原調(diào)節(jié)蛋白一抗

棗仁英文名稱:Semen Ziziphi Spisae保存:20℃,避光規(guī)格:1g神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子一抗

雪上一支蒿英文名稱:Sw a wormwood保存:20℃,避光規(guī)格:1.0g線粒體轉(zhuǎn)錄因子1一抗

徐長卿英文名稱:Cynanchum paniculatum保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g雞毒支原體一抗

豬殃殃英文名稱:Galium aparine L.保存:20℃,避光規(guī)格:4g髓鞘相關(guān)糖蛋白a一抗

金盞銀盤英文名稱:Biochemi保存:20℃,避光規(guī)格:2.0gmyocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子一抗
鐮雄腐霉保存8號染色體開放閱讀框34抗體Dihydromicromelin B中文名:別名:Dihydromelin B分子式:C15H14O6

M鈣粘附分子抗體Scoparone中文名:濱蒿內(nèi)酯別名:6,7-Dimethoxycoumarin分子式:C11H10O4

著絲粒蛋白B抗體Braylin中文名:布拉易林別名:分子式:C15H14O4

促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素結(jié)合蛋白抗體Fraxil中文名:別名:6-Hydroxy-5,7-dimethoxycoumarin分子式:C11H10O5

鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶4抗體Phebalosin中文名:別名:Alosin分子式:C15H14O4
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

 

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