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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
淋巴細胞抗原Ly6c抗體 | CD59 | BJ-K8131 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養雜交瘤細胞:體外培養雜交瘤細胞,從培養液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
OGYE Agar Oxytetracycline-Glucose-Yeast Ectract Agar Base人骨骼肌細胞cDNA5-溴-2-氯甲CK5(Cytokeratin 5) 細胞角蛋白5抗原
OGYE瓊脂/土霉素葡萄糖酵母瓊脂人骨骼肌衛星細胞cDNA氯化銥(III) 水合物CK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原
OGYE 選擇添加劑人骨骼肌成肌細胞cDNA4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶CK8(Cytokeratin 8) 細胞角蛋白8(多肽)
Orange serum agar橙血清瓊脂人腎小球內皮細胞cDNA4-氨基-7H-吡咯[2,3-d]嘧啶CKIP-1(casein kinase 2 ieraction protein 1) 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原
Oxford Listeria selective agar( base) 牛津李斯特氏菌選擇瓊脂(基礎)人腎近曲小管上皮細胞cDNA4-(氯甲酰)丁酸甲酯CLCA4(Calcium-activated chloride channel 4) 鈣激活氯離子通道4抗原
Oxford Listeria selective suppleme 牛津李斯特氏菌選擇添加劑人腎皮質上皮細胞cDNA4-(氯甲酰)丁酸甲酯C-Mer/MERTK (proto-oncogene tyrosine kinase) c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗原
PALCAM Listeria selective agar( base) acc.to van Netten et al.PALCAM人腎上皮細胞cDNA戊二酸單甲酯c-Myc tag c-Myc tag標簽多肽
李斯特氏菌瓊脂(基礎)人腎系膜細胞cDNA戊二酸單甲酯AU5 tag AU5 tag標簽抗原
IL-12/FITC 熒光素標記白介素12IgG卷曲螺旋結構域蛋白1205-氟吲哚-2-甲酸乙酯Rat SIRT1 (NAD-depende protein deacetylase sirtuin-1) 檢測試劑盒
IL-12/FITC 熒光素標記抗白介素12(人)IgG卷曲螺旋結構域蛋白233-喹啉Rat SCUBE1 (Signal Peptide, CUB and EGF-like Domain-coaining Protein 1)檢測試劑盒
IL-12R Beta1/CD212/FITC 熒光素標記白細胞介素-12受體β1IgG卷曲螺旋結構域蛋白89鄰氟Rat FNDC5 (Fibronectin type III domain-coaining protein 5) 檢測試劑盒
IL-12R Beta2/FITC 熒光素標記白細胞介素-12受體β2IgG卷曲螺旋結構域蛋白30鄰氟Rat GNMT (Glycine N-methyltransferase) 檢測試劑盒
IL-13/FITC 熒光素標記白介素13IgG卷曲螺旋結構域蛋白40鄰氟Rat HSD11β1 (11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1) 檢測試劑盒
IL-13Ra1/FITC 熒光素標記白細胞介素-13受體a1IgG卷曲螺旋結構域蛋白114鄰氟Rat FG (Fibrinogen) 檢測試劑盒
IL-13Ra2/FITC 熒光素標記白細胞介素-13受體a2IgG卷曲螺旋結構域蛋白392,4-二氟溴Rat MRC1 (Mannose Receptor C Type 1) 檢測試劑盒
IL-14/Taxilin alpha/FITC 熒光素標記抗白介素14IgG卷曲螺旋結構域蛋白342,4-二氟溴Rat PEMT (Phosphatidylethanolamine N-methyltransferase) 檢測試劑盒
淋巴細胞抗原Ly6c抗體釀酒酵母Mouse TLR9 (Toll-like Receptor 9) Kit
平菇Mouse FBXO32 (F-Box Protein 32) kit
芽枝狀枝孢Mouse CD8 (Cluster of Differeiation 8) Kit
小馬勃Mouse MuRF1 (muscle-specific RING-finger protein 1) kit
溶藻弧Mouse Toxoplasma IgA aibody Kit
蟬花*Mouse Toxoplasma IgD aibody Kit
哈茨木霉Mouse Toxoplasma IgG aibody Kit
閃光須霉Mouse Toxoplasma IgM aibody Kit
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