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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒微量法

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-08-19 21:32:47瀏覽次數(shù):225次

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貨號(hào) BJ-01611376-1
丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:弗林蛋白抗體L-Citrulline /FITC 熒光su標(biāo)記抗L-瓜氨抗體IgG
富含絲氨/精氨重復(fù)結(jié)構(gòu)蛋白抗體Lck/p56-LCK/FITC 熒光su標(biāo)記淋巴特異性蛋白酪氨激抗體IgG
/CSE1 凋亡敏感性基因血管生成抑制因子(Arresten)ELISA試劑盒
Phospho-Cas (Tyr165) 化凋亡敏感性基因血管

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611376-1

商品介紹:

 測(cè)定意義:

丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖異生過(guò)程的第一個(gè)限速酶,在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測(cè)定原理:

PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm下測(cè)定NADH氧化速率,即可反映PC活性

需自備的儀器和用品:

分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測(cè)定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測(cè)樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測(cè)效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無(wú)需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會(huì)對(duì)本試劑盒的檢測(cè)產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會(huì)使測(cè)定出來(lái)的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒(méi)有顏色,如果設(shè)置了使用說(shuō)明中的空白對(duì)照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

內(nèi)皮凝集suHL1抗體茯苓表告依春

干擾suα抗體閃光須霉麥冬

白介su-17F抗體米曲霉丁香葉

白介su6抗體(N端)谷ansuan棒桿菌石吊蘭

白介su6抗體香草蘭根疾

干擾suepsilon 1蛋白抗體鞘氨單胞菌屬枸櫞suan

suan化KB抑制蛋白激酶γ抗體葡萄座腔菌氨

suan化白介su1受體1抗體蘇云金芽胞桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種芐ansuan

白介su3抗體Marivirga tractuosa卡

異戊烯焦磷suan1抗體蠟狀芽孢桿菌鹽suan賽洛唑啉

suan化胰島su受體底物-1抗體食樹脂新鞘氨菌小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)Elisa測(cè)定試劑盒

suan化胰島su受體底物-1抗體光孢黃叢枝珊瑚菌轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體流式免疫組化

胰島su誘導(dǎo)基因1抗體約利曼漆斑菌抗“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體流式免疫組化anti-Fibulin 1

FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體金黃亞種葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體流式免疫組化

suan化白介su-1受體相關(guān)激酶4抗體Pseudarthrobacter層粘蛋白α5抗體流式免疫組化
丙酮酸羧化酶(PC)測(cè)試盒微量法乙酰fu酶A乙酰轉(zhuǎn)移酶2(ACAT2)試劑盒 Anti-CEBPZ Antibody心肌肌鈣蛋白

胰島su樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒Anti-CELA3B Antibody間隙連接蛋白32抗原

突觸足蛋白(SYNPO)試劑盒Anti-CEBPG Antibody間隙連接蛋白36抗原

Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1/BCL-X)試劑盒Anti-CELSR1 Antibody間隙連接蛋白40(多肽)

凝溶膠蛋白(GS)試劑盒 Anti-CELF1 Antibody趨化因子(C-X3-C 基元)配體1抗原

纖蛋白原(FG)試劑盒 Anti-CELSR2 AntibodyCX3C趨化因子受體1抗原

成熟促進(jìn)因子(MPF)試劑盒 Anti-CELSR3/Flamingo homolog 1 Antibody周期suA抗原   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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