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EBV轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞價(jià)格

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-03 10:32:59瀏覽次數(shù):190次

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細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
產(chǎn)品僅用于科研在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 
記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象

?
公司產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱:EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞
產(chǎn)品英文代號:B95-8

細(xì)胞培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài):懸浮生長

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度(℃):37

運(yùn)輸溫度(℃):常溫

運(yùn)費(fèi)基數(shù):活細(xì)胞包郵/凍存100-400元干冰費(fèi)

穩(wěn)定貨期(是or否):     是

產(chǎn)品名稱

 EBV轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞價(jià)格

規(guī)格

1×106

貨號

BJX6710


細(xì)胞培養(yǎng)及傳代:
<1>細(xì)胞培養(yǎng)
產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞請于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),大部分細(xì)胞是37℃,5% CO2,濕度環(huán)境下培養(yǎng)的。有極少部分細(xì)胞培養(yǎng)條件不,請仔細(xì)閱讀相應(yīng)的細(xì)胞說明書,使用正確的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件;
細(xì)胞于培養(yǎng)瓶或皿中培養(yǎng),加入適量說明書上標(biāo)注的細(xì)胞相應(yīng)*培養(yǎng)基(一般液面高度2-3mm即可)。
<2>細(xì)胞傳代(以下步驟適用于10cm皿)
細(xì)胞培養(yǎng)至密度達(dá)80%以上時(shí)即可傳代,先將細(xì)胞培養(yǎng)基取出3mL用15mL離心管裝好,其他培養(yǎng)基全部吸干舍棄;
培養(yǎng)皿加入2-3mL無菌PBS,輕輕晃動皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍棄;
加入1mL胰酶,輕輕晃動皿,使胰酶浸沒到皿底所有部位,將皿蓋好放入培養(yǎng)箱中消化;
3min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞不再貼壁,即可加入*步收集的培養(yǎng)基混勻;
若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至不貼壁為止;
將細(xì)胞懸液均勻分成幾份,分別加入不同培養(yǎng)皿中,補(bǔ)加新培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
<3>相關(guān)問題
部分細(xì)胞在傳代后時(shí),會有以下現(xiàn)象:細(xì)胞內(nèi)會有黑色小點(diǎn)、細(xì)胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞或者細(xì)胞長的極慢。出現(xiàn)以上現(xiàn)象時(shí),可以咨詢本公司技術(shù)人員此現(xiàn)象是否正常及相關(guān)處理方式,不要頻繁換液,大多數(shù)細(xì)胞1周換液2-3次即可。
細(xì)胞碎片較多、背景較臟時(shí),貼壁細(xì)胞用PBS漂洗兩次、懸浮細(xì)胞打散后低速離心(900rpm,3min)能有效改善。
傳代比例建議1:2-1:3,長得比較快的細(xì)胞可以1:3,比較慢的按1:2傳代。傳代后,建議不要使用傳代前培養(yǎng)所使用的培養(yǎng)基,會有大量細(xì)胞碎片甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡的風(fēng)險(xiǎn)。
細(xì)胞狀態(tài)不好或者生長極慢的時(shí)候,可以通過增加血清濃度調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)及生長速度。
請不要隨意更換培養(yǎng)基,因?qū)嶒?yàn)需要,可以逐步馴化。
懸浮傳代:混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞懸液900-1000rpm離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗一次。 ?

操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線。
細(xì)胞凍存步驟: 
   待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。明舟生物按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復(fù)蘇細(xì)胞步驟:    將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
微管關(guān)聯(lián)蛋白4(MAP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 斐濟(jì)球腔菌 1g

雙特異性磷酸酶1(DUSP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 鼠李糖乳桿菌 5g

細(xì)胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98%(~25%water) 紅色紅曲 25g

細(xì)胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98%(~25%water) 阿穆爾斯克灣鹽地桿菌 5g

δ樣蛋白4(δLL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 柴油食烷菌 100mg

T-框蛋白3(TBX3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 金孢霉屬 1g

胃脂酶(LIPF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 淺紫灰直絲鏈霉菌 1g

粘蛋白2(MUC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 枯草芽孢桿菌枯草亞種 25g

纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 木霉 5g

非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 壁節(jié)桿菌 100g

Ⅱ型膠原α1(COL2α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 展示接霉 25g

C-Mer原癌基因酪氨酸激酶(MERTK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 90% 彩色豆馬勃 100ml

Janus激酶3(JAK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 90% 谷氨酸棒桿菌 500ml

纖維蛋白原γ(FGγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種 500mg

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 平菇(雪蓮菇) 5MG

心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 乳桿菌屬 1g

三碘甲狀腺原氨酸(T3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 梅林青霉 5g

補(bǔ)體成分4b(C4b)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 副豬嗜血桿菌 1g
EBV轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞價(jià)格人腦膜Human Brain: Normal Brain Meninges CellsDerivatives人腦膜細(xì)胞分離自正常人腦膜組織,主要功能:(1)腦膜細(xì)胞圍繞著大腦,參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育。(2)細(xì)胞能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒Progesterone Receptor A/B (C89F7) Rabbit mAb100 ul

人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) Antibody100 ul

人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAb100 ul

人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒Progesterone Receptor B (C1A2) Rabbit mAb100 ul

人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒IFN-γ (3F1E3) Mouse mAb100 ul

人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) Antibody100 ul

人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒PDGF Receptor β Antibody100 ul

人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒PDGF Receptor α Antibody100 ul

 

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