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H2S含量測試盒可見分光光度法

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更新時(shí)間:2022-08-19 13:58:22瀏覽次數(shù):152次

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貨號 BJ-01611346-2
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

H2S含量測試盒可見分光光度法

可見分光光度法

50管/48樣

BJ-01611346-2

商品介紹:

測定意義

 

H2S是一種新型氣態(tài)信號分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。

 

測定原理

 

H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰,通過測定其吸光值可計(jì)算H2S含量。

 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

 

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。

優(yōu)點(diǎn)如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn): X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A(chǔ)。

注意事項(xiàng):

待測樣品-70℃可保存1個(gè)月。需注意反復(fù)凍融會導(dǎo)致SOD部分失活。

一個(gè)試劑盒如果不能在3次內(nèi)使用完畢,其中的WST-8需要在使用時(shí)適當(dāng)分裝,以避免反復(fù)凍融導(dǎo)致的檢測效果下降。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)所用的稀釋液應(yīng)盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品也宜使用SOD樣品制備液進(jìn)行稀釋;當(dāng)樣品為血液等無需處理的樣品時(shí),宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產(chǎn)生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時(shí)盡管樣品沒有顏色,如果設(shè)置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體杰丁畢赤酵母Smad 7抗體流式免疫組化

人絨毛膜促性腺激suα 亞基單抗球孢白僵菌酪ansuan激酶B抗體流式免疫組化(神經(jīng)生長因子受體的一種)IHC WB

人乙型肝炎表面抗原單克隆抗體(檢測)污膠鼓菌D-亮ansuan

人乙型肝炎e抗原單克隆(包被)抗體白色沉積物桿菌多聚右旋賴ansuan

人乙型肝炎e抗原單克隆(檢測)抗體根瘤菌DL-正纈ansuan

小鼠抗人血紅蛋白單克隆抗體拜氏醋桿狀菌崩潰酶

甲型流感病血凝su抗體貝倫格葡萄座腔菌梨生專化型鹽suan

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組蛋白去乙酰化酶4抗體谷ansuan棒桿菌Ⅰ型胞苷

suan化HER2受體抗體假單胞菌屬5-尿苷一磷suan二鈉鹽

suan化組蛋白去乙酰化酶8抗體莖點(diǎn)霉屬天青I

HLA-DR抗體黃柄油菌葡聚糖凝膠LH-60

人類白抗原G抗體枯草芽孢桿菌葡聚糖凝膠QAE-A25

高遷移率族蛋白A2抗體枯草芽孢桿菌1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺suan鈉

高遷移率族蛋白B1抗體丁香直絲鏈霉菌2-羥基-1-萘甲suan
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角蛋白17(CK17/KRT17)試劑盒 Anti-ATF1 Antibody血管組織血管緊張suⅡ1型受體抗原

低分子量角蛋白(CK-LMW)試劑盒Anti-ATF3 Antibody

甘氨酰tRNA合成酶(GARS)試劑盒  Anti-ATG16L2 Antibody芳香烴受體抗原

生長因子受體結(jié)合蛋白2(Grb2)試劑盒Anti-ATF7 AntibodyFe65 蛋白(多肽抗原)

Fas凋亡抑制分子3(FAIM3)試劑盒Anti-ATG4A Antibody肝su結(jié)合生長因子(性成纖維生長因子)(多肽片斷抗原)

腫瘤壞死因子配體超家族成員14(TNFSF14)試劑盒Anti-ATG4C Antibody原酶 (又稱:纖維介su蛋白;前凝血su)   

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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